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Saggi di migrazione cellulare

  • Possibilità di mantenere libero lo strumento utilizzando il time-lapse discontinuo e trasportando la piastra tra l’imager e l’incubatore
  • Uso di cellule colorate in fluorescenza o non marcate
  • Saggi scalabili utilizzabili in micropiastre a 96 pozzetti per lo screening farmacologico
  • Creazione ed esportazione di filmati di cellule vive mantenute all’interno dello strumento e sottoposte automaticamente a imaging nel tempo
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Misurazione della migrazione di cellule vive nel tempo mediante saggi di migrazione cellulare con imaging automatizzato

Il movimento o migrazione delle cellule viene spesso misurato in vitro per chiarire i meccanismi di varie attività fisiologiche, come la cicatrizzazione delle ferite o la metastasi delle cellule tumorali. I saggi di migrazione cellulare possono essere eseguiti in un ambiente controllato utilizzando l’imaging in time-lapse su cellule vive. In un monostrato di cellule a confluenza coltivate in una micropiastra viene creata una “ferita” facendo manualmente un graffio oppure utilizzando micropiastre speciali che presentano una zona uniforme e riproducibile priva di cellule. È possibile monitorare la proliferazione cellulare, la migrazione e la dispersione utilizzando tecniche a luce trasmessa o a fluorescenza compatibili con le cellule vive. Questi saggi a rendimento medio o alto possono essere utilizzati per confrontare la migrazione tra cellule trattate con composti inibitori o stimolanti.
  • Acquisizione di immagini in time-lapse discontinuo

    Sistema ImageXpress Micro con software MetaXpress 6,5+

    Il software MetaXpress permette all’utente di combinare facilmente acquisizioni effettuate a diversi intervalli di tempo in un unico esperimento in time-lapse per semplificare la visualizzazione e l’analisi.

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    Analisi dell’area delle cellule mediante imaging in luce trasmessa o a fluorescenza

    Analisi dell’area delle cellule mediante imaging in luce trasmessa o a fluorescenza

    In questo saggio, processi di proliferazione cellulare, migrazione e dispersione hanno contribuito tutti alla capacità delle cellule di chiudere la ferita. L’imaging automatizzato in time-lapse in luce trasmessa o con metodi a fluorescenza compatibili con le cellule vive ha offerto la possibilità di misurare l’evoluzione della “cicatrizzazione”. Le immagini ottenute in qualsiasi punto temporale possono essere analizzate in maniera obiettiva con il software di analisi delle immagini ad alto contenuto, che permette di riportare i dati in grafico come una sequenza temporale o valutarli individualmente per esaminare momenti specifici.

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  • Analisi della migrazione cellulare con il saggio Oris Pro

    Analisi della migrazione cellulare con il saggio Oris Pro

    In questo saggio viene utilizzato un gel biocompatibile non tossico per ottenere una zona priva di cellule al centro del pozzetto. Dopo la semina delle cellule, il gel biocompatibile si scioglie permettendo alle cellule di migrare nella zona di rilevazione al centro del pozzetto. Per le immagini acquisite con il citometro MiniMax, viene specificata una regione di interesse corrispondente alla zona di rilevazione e viene analizzato il livello di migrazione cellulare (area coperta da cellule).

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    Valutazione della migrazione cellulare con Fluoroblok

    Valutazione della migrazione cellulare con Fluoroblok

    Il lettore SpectraMax i3x e il citometro MiniMax possono essere utilizzati con gli inserti per coltura cellulare FluoroBlok per contare direttamente le cellule a partire da immagini ad alta qualità allo scopo di misurare la migrazione cellulare nel tempo. Il software SoftMax Pro permette agli utenti di configurare rapidamente l’analisi delle conte cellulari attraverso una semplice interfaccia di tipo “punta e clicca”. L’analisi delle immagini fornisce dati accurati rispetto alla rilevazione della fluorescenza grezza, che è soggetta ai livelli di colorazione cellulare e alla fluorescenza di fondo. Utilizzando le funzioni di acquisizione e analisi delle immagini del software SoftMax Pro in combinazione con gli inserti FluoroBlok nel formato a 96 pozzetti, i ricercatori possono valutare rapidamente una grande quantità di dati relativi alla migrazione cellulare per approfondire i loro studi sui tumori e in molte altre aree della biologia.

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  • Creazione di filmati a partire da immagini in time-lapse

    Creazione di filmati a partire da immagini in time-lapse

    Con pochi clic, il software MetaXpress permette di creare filmati a partire da immagini grezze, lunghezze d’onda sovrapposte o maschere di analisi.

    Misurazione della migrazione cellulare

    Misurazione della migrazione cellulare

    La migrazione cellulare, ossia il movimento delle cellule, è importante per la cicatrizzazione delle ferite, l’immunologia, lo sviluppo embrionale e per eventi cellulari anomali come le metastasi tumorali. I saggi di migrazione cellulare vengono utilizzati per misurare la motilità delle cellule in un ambiente controllato; a tal fine, vengono spesso adoperati saggi di “scratch” e saggi che prevedono l’uso di micropiastre con “ferite” preformate. Eseguendo il saggio in una micropiastra a 96 o 384 pozzetti, è possibile testare in unico esperimento controllato con un numero adeguato di replicati numerosi composti in grado di influire sulla capacità delle cellule di migrare, come ad esempio composti chemioterapeutici o farmaci per velocizzare la cicatrizzazione delle ferite.

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  • Quantificazione obiettiva della migrazione cellulare

    Quantificazione obiettiva della migrazione cellulare

    La migrazione cellulare è un processo fondamentale nel normale sviluppo, nella funzione immunitaria e nella cicatrizzazione delle ferite. Alterazioni della migrazione cellulare sono caratteristiche di patologie come le malattie cardiovascolari e i tumori. Il sistema di imaging CloneSelect permette di rivelare gli effetti in vitro dei composti terapeutici candidati e delle matrici per coltura cellulare sulla migrazione cellulare e di studiare le interazioni cellula-cellula. Il software per le applicazioni di migrazione disponibile nell’imager CloneSelect consente di eseguire misurazioni di migrazione cellulare basate sulla rilevazione obiettiva delle cellule.

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    Ordinamento dei valori per visualizzare i dati di interesse

    Sistema ImageXpress Pico con software CellReporterXpress - Analisi tabulare

    È possibile utilizzare il formato di analisi tabulare per visualizzare i risultati delle misurazioni di interesse senza dover esaminare i singoli pozzetti. Il formato di analisi tabulare consente anche agli utenti di ordinare i valori per colonne.

  • Visualizzazione dei trend per le misurazioni di interesse

    Sistema ImageXpress Pico con software CellReporterXpress - Analisi con diagramma di dispersione

    Il formato di analisi con diagramma di dispersione permette agli utenti di identificare trend per le misurazioni di interesse nei pozzetti selezionati. In questo esempio, possiamo vedere che le cellule trattate con citocalasina D sono migrate nella zona priva di cellule in maniera meno completa rispetto al controllo non trattato.

    Panoramica dell’intera piastra

    Sistema ImageXpress Pico con software CellReporterXpress - Visualizzazione intuitiva delle immagini

    Un montaggio di anteprime di immagini a basso ingrandimento (4X) di un saggio di migrazione cellulare OrisPro nel formato a 96 pozzetti illustra il vantaggio offerto dalla presenza di una zona priva di cellule omogenea per la misurazione della migrazione cellulare.

Ultime risorse

Risorse per i saggi di migrazione cellulare

Video e webinar

Creazione di filmati a partire da immagini in time-lapse

Creazione di filmati a partire da immagini in time-lapse

Acquisizione di un video in time-lapse discontinuo sul sistema ImageXpress Micro

Acquisizione di un video in time-lapse discontinuo sul sistema ImageXpress Micro

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