Salute cellulare: Vitalità, proliferazione, citotossicità e funzione cellulare

Studio della citotossicità mediante il saggio di proliferazione cellulare Delfia

La proliferazione cellulare è un parametro importante da misurare quando si valuta la tossicità dei composti o l’effetto delle citochine su una popolazione cellulare. Poiché la proliferazione cellulare richiede la sintesi di DNA, un metodo accurato per misurarla consiste nel monitorare la captazione del nucleotide timidina modificato BrdU1. Il saggio di proliferazione cellulare DELFIA® è un immunodosaggio a tempo risolto basato sull’incorporazione di BrdU nei filamenti di DNA di nuova sintesi delle cellule proliferanti.

In questa nota applicativa, abbiamo utilizzato il saggio di proliferazione cellulare DELFIA per valutare la citotossicità dei farmaci chemioterapici paclitaxel ed etoposide in cellule HeLa utilizzando il lettore per micropiastre multimodale SpectraMax® i3.

Nota applicativa: Saggio di proliferazione cellulare Delfia sul lettore per micropiastre multimodale SpectraMax i3

Saggi di vitalità cellulare basati sull’ATP

I saggi in luminescenza basati sull’ATP per la vitalità cellulare e la citotossicità offrono un metodo rapido e sensibile per misurare il numero di cellule vitali in coltura e quantificare gli effetti citotossici dei trattamenti sperimentali. Con il lettore per micropiastre SpectraMax®, questi saggi possono essere eseguiti in un formato ad alto rendimento.

Scoprite il saggio di vitalità cellulare in luminescenza CellTiter-Glo e altro:

• Saggi di vitalità cellulare e citotossicità in luminescenza sul lettore per micropiastre multimodale SpectraMax i3x
• Misurazione della vitalità delle cellule tumorali utilizzando un saggio in luminescenza stabile e omogeneo

Saggi colorimetrici di vitalità cellulare, proliferazione cellulare, citotossicità (MTT, XTT, MTS)

I saggi colorimetrici che impiegano sali di tetrazolio come MTT, XTT e MTS possono essere usati per misurare la proliferazione cellulare e la citotossicità. Gli enzimi presenti nelle cellule vitali riducono un reagente cromogeno per formare un prodotto colorato che può essere quantificato mediante la misurazione dell’assorbanza.

Per avere informazioni su alcune di queste metodiche leggere la nota applicativa:

• Valutate la vitalità e proliferazione cellulare con letture colorimetriche

Kit di saggio della vitalità cellulare EarlyTox

I saggi di vitalità cellulare sono fondamentali per un ampio spettro di aree di ricerca che spaziano dall'indagine dei meccanismi di morte cellulare allo sviluppo di nuovi composti terapeutici mirati all'apoptosi nelle malattie. Una delle tecnologie di rilevazione più diffuse per la vitalità cellulare è un lettore per micropiastre a fluorescenza.

Ecco alcune applicazioni che possono essere di vostro interesse:

• Misurazione della morte cellulare sul lettore SpectraMax iD3 con saggi di vitalità cellulare
• Kit di saggio EarlyTox Live/Dead su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax
• Kit di saggio EarlyTox Caspase-3/7 R110 su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax
• Kit di saggio del glutatione EarlyTox su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax

Misurazione del metabolismo ossidativo e dell’attività glicolitica

Per sopravvivere, le cellule richiedono carburante sotto forma di ATP per eseguire la maggior parte dei bioprocessi essenziali. Questo carburante viene generato attraverso la glicolisi e la respirazione mitocondriale. Benché entrambi questi processi producano ATP, la glicolisi può avvenire in assenza di ossigeno, mentre i mitocondri hanno bisogno di ossigeno per la fase finale della fosforilazione ossidativa (OXPHOS). Capire in che modo queste vie rispondono ai composti effettori può fornire informazioni utili sul funzionamento generale delle cellule e sui meccanismi sottostanti che ne determinano il destino.

Leggete la nostra nota applicativa per approfondire le vostre conoscenze sull’acquisizione di dati in tempo reale e sull’analisi dell’evoluzione del consumo di ossigeno e dell’attività glicolitica:

• Nota applicativa: Misurazione del metabolismo ossidativo e dell’attività glicolitica sul lettore SpectraMax i3x

Misurazione della proliferazione cellulare utilizzando il kit CyQUANT

La quantificazione della proliferazione cellulare usando la fluorescenza permette di monitorare agevolmente gli effetti dei farmaci e di altri trattamenti sperimentali sulla crescita cellulare. Il kit del saggio di proliferazione cellulare CyQUANT di Life Technologies offre un metodo pratico, rapido e sensibile per quantificare la crescita cellulare utilizzando un lettore di fluorescenza per micropiastre.

Questa nota applicativa descrive come utilizzare il kit CyQUANT con i lettori per micropiastre SpectraMax® e il software SoftMax® Pro di Molecular Devices.

Nota applicativa: Misurazione della proliferazione cellulare usando il saggio di proliferazione cellulare CyQUANT con i lettori per micropiastre SpectraMax

Specie reattive dell’ossigeno (ROS)

Le specie reattive dell’ossigeno (Reactive Oxygen Species, ROS) sono molecole chimicamente reattive che contengono ossigeno. Negli eucarioti, queste molecole vengono generate principalmente durante la respirazione aerobica e possono causare problemi, come danni al DNA e perossidazione dei lipidi, con conseguenti danni cellulari.  

Viene illustrato come possono essere utilizzati i lettori per micropiastre SpectraMax per quantificare in maniera accurata i livelli di ROS utilizzando un saggio basato sulla luminescenza:

• Misurazione delle specie reattive dell’ossigeno con i lettori per micropiastre SpectraMax