Variazione del segnale del flusso di calcio

La lunghezza d’onda di eccitazione del Fura-2 legato al calcio è 340/510 nm, mentre quella della forma non legata è 380/510 nm. Dopo il flusso di calcio, la concentrazione del calcio nel citoplasma aumenta, provocando un incremento proporzionale dell’intensità della fluorescenza a 340/510 nm. Al contrario, l’intensità a 380/510 nm diminuisce di pari passo con la riduzione della concentrazione del colorante non legato. Attraverso il calcolo del rapporto tra le intensità della fluorescenza prodotte dall’eccitazione a due lunghezze d’onda, gli artefatti associati a una distribuzione non omogenea del colorante e alla variazione del numero di cellule vengono ridotti al minimo perché influiscono allo stesso modo su entrambe le misurazioni.