Misurazione del flusso di calcio intracellulare
I recettori accoppiati a proteina G (G-Protein Coupled Receptors, GPCR) svolgono un ruolo importante nella segnalazione cellulare. Quando il recettore viene attivato da un ligando, la sua conformazione cambia, determinando l’attivazione della proteina G all’interno della cellula. Una proteina G attiva ha la potenzialità di indurre varie cascate di messaggeri intracellulari, tra cui il calcio. Il sistema FLIPR permette di eseguire saggi funzionali ad alto rendimento basati su cellule ed è il sistema di elezione nella scoperta farmacologica per la valutazione delle variazioni nei livelli di calcio intracellulare rilevate attraverso l’uso di coloranti reporter fluorescenti sensibili al calcio. Qui è descritto un protocollo di base per l’esecuzione di un saggio per la mobilizzazione del calcio sul sistema FLIPR utilizzando il kit del saggio per il calcio FLIPR®, un saggio in fluorescenza omogeneo, rapido e affidabile.
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