Efficienza di trasfezione
L’efficienza di trasfezione di un gene reporter fluorescente può essere monitorata in vari modi. Uno di essi consiste nel misurare la fluorescenza con un lettore per micropiastre. Questo metodo permette di valutare il livello complessivo di fluorescenza in ciascun pozzetto del test, ma non fornisce la percentuale di cellule trasfettate. Un metodo più informativo per valutare l’efficienza di trasfezione consiste nell’analizzare le cellule utilizzando un citometro per imaging, che consente di determinare il numero di cellule che esprimono un livello di fluorescenza rilevabile rispetto al numero di cellule totali. Il citometro per imaging offre l’ulteriore vantaggio di permettere il calcolo della confluenza cellulare prima della trasfezione, un’informazione che può essere utilizzata nell’ambito dello sviluppo del saggio.