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Kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
La segnalazione cellulare mediata dai recettori accoppiati a proteina G (G-Protein Coupled Receptors, GPCR) può essere valutata monitorando gli effettori a valle come il calcio o l’AMP ciclico (cAMP). Il monitoraggio dei livelli di cAMP, un secondo messaggero prodotto in risposta all’attivazione dell’adenilato ciclasi, è uno dei metodi più comuni per lo screening di agonisti e antagonisti dei GPCR.
Kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
I reagenti ad alta affinità del kit del saggio in fluorescenza del cAMP sono ottimizzati per offrire sensibilità e precisione in applicazioni in cui i livelli di cAMP sono bassi. Un singolo passaggio di lavaggio rimuove il materiale non legato prima del passaggio di sviluppo, per cui il saggio è molto resistente all’interferenza da parte di composti in esame colorati o fluorescenti. Per generare una lettura in fluorescenza stabile, viene utilizzato il substrato proprietario Stoplight Red, che permette di ottenere il risultato in soli 10 minuti e di leggerlo fino a 24 ore dopo l’aggiunta del substrato.
Vantaggi del kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP:
- I reagenti ad alta affinità sono ottimizzati per offrire sensibilità quando i livelli di cAMP sono bassi, permettendo di ottenere risultati in condizioni in cui non è possibile con altri saggi.
- Grazie al solido formato, il saggio resiste all’interferenza da parte di composti colorati o fluorescenti, migliorando l’affidabilità dei risultati.
- Il rapido sviluppo del segnale (< 10 min) e l’assenza di un passaggio di terminazione offrono agli utenti un tempo di lettura flessibile, compatibile con l’automazione e lo screening ad alto rendimento.
- Il metodo quantitativo permette un’accurata determinazione del cAMP nei campioni.
Dati sul kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
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Curva di calibrazione del cAMP
La curva di calibrazione per il kit del saggio CatchPoint® cAMP è stata generata utilizzando un lettore per micropiastre multimodale SpectraMax® M5. I dati sono stati acquisiti 24 ore dopo l’aggiunta del substrato Stoplight Red. Il valore EC50 della curva di calibrazione del cAMP è risultato pari a 5,1 nM.
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Curva dose-risposta per la forskolina in cellule HEK293
10.000 cellule sono state stimolate in un volume di 20 μl per 15 minuti, dopodiché sono state lisate e analizzate con il kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP. I dati sono stati generati utilizzando un lettore per micropiastre multimodale SpectraMax M5.
Tecnologia del kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
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Principio del saggio CatchPoint cAMP
Il cAMP presente nel campione o nello standard compete con il coniugato di cAMP marcato con perossidasi di rafano (Horseradish Peroxidase, HRP) per i siti di legame sugli anticorpi anti-cAMP. In assenza di cAMP, la maggior parte del coniugato HRP-cAMP si lega all’anticorpo. Concentrazioni crescenti di cAMP riducono in maniera competitiva la quantità di coniugato legato, provocando una diminuzione dell’attività dell’HRP misurata.
Opzioni per ordinare il kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
Kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
Kit di esame (96 pozzetti) - PN: R8088
- Due (2) piastre con pozzetti neri/a fondo trasparente a 96 pozzetti
- 100 ml di tampone del saggio ELISA
- 1 flaconcino di anticorpo di coniglio anti-cAMP
- 1 flaconcino di calibratore del cAMP
- 1 flaconcino di coniugato HRP-cAMP
- 100 ml di concentrato di soluzione di lavaggio 10X
- 50 ml di tampone di lisi cellulare
- 1 flaconcino di substrato 100X
- 100 ml di tampone per substrato
#R8088
Kit di materiale sfuso (96 pozzetti) - PN: R8089
- Dieci (10) piastre con pozzetti neri/a fondo trasparente a 96 pozzetti
- 950 ml di tampone del saggio ELISA
- 2 flaconcini di anticorpo di coniglio anti-cAMP
- 2 flaconcini di calibratore del cAMP
- 2 flaconcini di coniugato HRP-cAMP
- 950 ml di concentrato di soluzione di lavaggio 10X
- 450 ml di tampone di lisi cellulare
- 2 x 900 µl di substrato 100X
- 950 ml di tampone per substrato
#R8089
Kit di esame (384 pozzetti) - PN: R8044
- Due (2) piastre con pozzetti neri/a fondo trasparente a 384 pozzetti
- 100 ml di tampone del saggio ELISA
- 2 flaconcini di anticorpo di coniglio anti-cAMP
- 2 flaconcini di calibratore del cAMP
- 2 flaconcini di coniugato HRP-cAMP
- 100 ml di concentrato di soluzione di lavaggio 10X
- 25 ml di tampone di lisi cellulare
- 1 flaconcino di substrato 100X
- 100 ml di tampone per substrato
#R8044
Risorse del kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
Nota applicativa
Soluzione completa per il flusso di lavoro per il cAMP usando il kit di saggio fluorescente per il cAMP CatchPoint
Complete cAMP workflow solution using the CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
I recettori accoppiati a proteina G (G-Protein Coupled Receptors, GPCR) sono importanti proteine transmembrana che traducono i segnali extracellulari in risposte intracellulari. Queste risposte intracellulari sono costituite…
eBook
Saggi ottimizzati per ricerche all’avanguardia
Optimized Assays for Breakthrough Research
La ricerca biologica è stata notevolmente semplificata dagli strumenti, dai protocolli e dai kit di saggi standardizzati resi disponibili dai produttori commerciali.
Scheda dati
Kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
Il kit del saggio CatchPoint® Cyclic-AMP permette di misurare i livelli di cAMP e l’attività dell’adenilato ciclasi mediante un immunodosaggio competitivo. I reagenti ad alta affinità del saggio sono ottimizzati per offrire…
Prodotti e servizi compatibili del kit del saggio in fluorescenza CatchPoint cAMP
Come possiamo aiutarvi a fare progressi nella vostra prossima scoperta?
I nostri team altamente qualificati sono in prima linea con i clienti che seguiamo, conducendo dimostrazioni di prodotti da remoto o sul posto, webinar e altro per aiutarvi a risolvere le sfide più ardue poste dalla ricerca. Come possiamo esservi d’aiuto oggi?
Vorrei…
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