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Panoramica del kit del saggio del potassio FLIPR

Il kit del saggio del potassio FLIPR sfrutta la permeabilità agli ioni tallio (Tl+) dei canali del potassio (K+) sia voltaggio-dipendenti che ligando-dipendenti. In questo saggio viene utilizzato un innovativo colorante indicatore del Tl+ altamente sensibile, che produce un intenso segnale fluorescente dopo il legame del Tl+ passato attraverso i canali del potassio. L’intensità del segnale del Tl+ è proporzionale al numero di canali del potassio che si trovano nello stato aperto e pertanto fornisce un’indicazione funzionale dell’attività di questi canali. Inoltre, viene utilizzato uno dei nostri coloranti di mascheramento proprietari per ridurre ulteriormente la fluorescenza di fondo allo scopo di migliorare il rapporto segnale/rumore.

  • Misurazione funzionale dell’attività dei canali del potassio in un saggio basato su cellule
  • Il protocollo omogeneo senza lavaggio riduce la variabilità tra i pozzetti e semplifica il flusso di lavoro
  • Finestra del segnale più estesa rispetto ai saggi non omogenei
  • Procedura rapida con riduzione del tempo di lavoro manuale

Dati sul kit del saggio del potassio FLIPR

  • Confronto dei risultati ottenuti con il kit del saggio del potassio FLIPR

    Confronto tra kit per il potassio

    Confronto dei risultati ottenuti con il kit del saggio del potassio FLIPR e un kit della concorrenza.

  • Confronto delle finestre del segnale

    Confronto dell’intervallo dinamico del segnale tra il kit del saggio del potassio FLIPR e un kit della concorrenza. Il controllo negativo è costituito da terfenadina 4 μM; il controllo positivo è costituito dal tampone. Il fattore Z’ per il kit del saggio del potassio FLIPR è = 0,85 con n = 32 mentre il fattore Z’ per il kit della concorrenza è = 0,64 con n = 30.

    Confronto dell’intervallo dinamico del kit del saggio del potassio FLIPR

  • Inibizione concentrazione-dipendente del canale hERG

    Inibizione del canale hERG

    Inibizione concentrazione-dipendente del canale hERG da parte di composti di riferimento.

  • Ottimizzazione di stimolanti del canale hERG

    Le cellule sono state incubate con il colorante e i tamponi stimolanti sono stati aggiunti durante la rilevazione sul sistema FLIPR Tetra. La risposta concentrazione-dipendente del segnale è stata caratterizzata in diverse condizioni. Il segnale ottimale è stato ottenuto con una combinazione di Tl+ 1 mM e tampone stimolante contenente K+ 10 mM (concentrazione finale) diluito in tampone privo di cloruro.

    Ottimizzazione di stimolanti del canale hERG

Tecnologia del kit del saggio del potassio FLIPR

  • Meccanismo del kit del saggio

    Meccanismo del kit del saggio del potassio FLIPR

    Il saggio sfrutta la permeabilità al tallio (Tl+) dei canali del potassio (K+). Le cellule vengono incubate con una forma esterificata con AM di un colorante fluorescente sensibile al tallio. Le esterasi intracellulari scindono il gruppo AM intrappolando il colorante nelle cellule. Le cellule vengono poi stimolate con una combinazione di K+ e Tl+ o con un ligando in presenza di Tl+. L’aumento del segnale fluorescente rappresenta l’afflusso specifico di Tl+ nella cellula attraverso i canali del potassio e può essere utilizzato come misura della loro attività funzionale. Il background viene ridotto dalla soluzione di mascheramento.

Opzioni per ordinare il kit del saggio del potassio FLIPR

Kit del saggio del potassio FLIPR

Kit di esame - PN: R8222

  • (10) flaconcini di componente A
  • (1) flacone di componente B*, tampone del saggio HBSS + Ca2+, Mg2+ e HEPES 20 mM, pH 7,4
  • (10) flaconcini di componente C
  • (1) flacone di tampone del saggio privo di cloruro 5X
  • (1) flacone di soluzione di solfato di potassio (200 mM)
  • (1) flacone di soluzione di solfato di tallio (50 mM)

Ogni kit contiene materiale sufficiente per dieci (10) micropiastre a 96 pozzetti o a 384 pozzetti. Ogni flaconcino è sufficiente per un esperimento su una (1) micropiastra.

#R8222

$890.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8223

  • (10) flaconcini di componente A
  • (10) flaconcini di componente C
  • (1) flacone di tampone del saggio privo di cloruro 5X
  • (1) flacone di soluzione di solfato di potassio (200 mM)
  • (1) flacone di soluzione di solfato di tallio (50 mM)

Ogni kit contiene materiale sufficiente per cento (100) micropiastre a 96 pozzetti o a 384 pozzetti. Ogni flaconcino è sufficiente per esperimenti su dieci (10) micropiastre.

#R8223

$5,347.00 USD

1

Kit di valutazione - PN: R8330

  • (2) flaconcini di componente A
  • (1) flacone di componente B*, tampone del saggio HBSS + Ca2+, Mg2+ e HEPES 20 mM, pH 7,4
  • (2) flaconcini di componente C
  • (1) flacone di tampone del saggio privo di cloruro 5X
  • (1) flacone di soluzione di solfato di potassio (200 mM)
  • (1) flacone di soluzione di solfato di tallio (50 mM)

Ogni kit contiene materiale sufficiente per due (2) micropiastre a 96 pozzetti o a 384 pozzetti. Ogni flaconcino è sufficiente per un esperimento su una (1) micropiastra.

#R8330

$439.00 USD

1

Risorse del kit del saggio del potassio FLIPR

Presentazioni
Video e webinar
Sviluppo di un saggio per il flusso di Tl+ in vitro per il canale del potassio

Sviluppo di un saggio per il flusso di Tl+ in vitro per l'identificazione di agonisti del canale del potassio