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Kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori

Fino a poco tempo fa, erano utilizzati composti marcati radioattivamente per misurare la captazione dei trasportatori di serotonina, norepinefrina e dopamina. Con l’introduzione del kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori, i ricercatori hanno ora a disposizione uno strumento per valutare in cellule vive la captazione cinetica di questi tre neurotrasmettitori fondamentali.

  • Questo saggio omogeneo in fluorescenza su cellule vive sostituisce i saggi basati sulla radioattività, riducendo i costi di smaltimento ed eliminando i rischi di sicurezza associati all’uso di composti radiomarcati
  • Il formato di questo saggio omogeneo in un unico passaggio lo rende adatto all’automazione e allo screening ad alto rendimento
  • Le due opzioni di configurazione del saggio offrono una maggiore flessibilità: la modalità al punto finale per le applicazioni ad alto rendimento o la modalità cinetica in tempo reale per gli studi meccanicistici

Dati sul kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori

  • Inibizione con nisoxetina in cellule HEK-hSERT

    Inibizione con nisoxetina in cellule HEK-hSERT

    Cellule HEK con espressione stabile del SERT umano sono state seminate la sera prima del saggio a una densità di 10.000 cellule per pozzetto in piastre a 384 pozzetti rivestite con poli-D-lisina. Il terreno è stato rimosso e le cellule sono state incubate con nisoxetina (Ki pubblicato = 383 nM) in HBSS/0,1% BSA per 10 minuti a 37 °C prima dell’aggiunta del colorante. Il saggio è stato eseguito come indicato nel protocollo sperimentale e analizzato sul lettore FlexStation® 3 di Molecular Devices in modalità cinetica per 30 minuti.

  • Flessibilità di semina

    Cellule HEK con espressione stabile del NET umano sono state seminate la sera prima (cerchietti blu vuoti) o il giorno del saggio (quadratini neri pieni) a una densità di 20.000 cellule per pozzetto in piastre a 384 pozzetti rivestite con poli-D-lisina e lasciate aderire per 3 ore. Il terreno è stato rimosso e le cellule sono state incubate con nomifensina in HBSS/0,1% BSA per 10 minuti a 37 °C prima dell’aggiunta del colorante. Il saggio è stato analizzato sul lettore FlexStation® 3 in modalità cinetica per 30 minuti. La curva di inibizione è espressa come area sotto la curva.

    Flessibilità di semina

  • Correlazione del valore IC50 per DAT, NET e SERT (risultati di un cliente)

    Correlazione del valore IC50 per DAT, NET e SERT (risultati di un cliente)

    Cellule con espressione stabile di DAT, NET e SERT umani sono state seminate la sera prima del saggio a una densità di 60,000 cellule/pozzetto (piastra a 96 pozzetti) e trattate con 8 inibitori noti diversi. Dopo 10 minuti è stata aggiunta la soluzione del colorante e il saggio è stato eseguito secondo il protocollo descritto sopra. In base ai dati ottenuti, è stato calcolato il log Ki utilizzando l’equazione di Cheng-Prusoff ed è stata determinata una correlazione con i valori Ki noti per tutti e tre i trasportatori. Nel grafico sono presentati i coefficienti di correlazione R2 per ciascun trasportatore; il coefficiente di correlazione (valore R2) per tutti e 24 i valori è risultato pari a 0,91.

Tecnologia del kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori

  • Principio del saggio per i neurotrasmettitori

    Principio del saggio per i neurotrasmettitori

    Il kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori utilizza un substrato fluorescente che simula i neurotrasmettitori costituiti da ammine biogene e viene portato all’interno della cellula attraverso questi trasportatori specifici, determinando un aumento dell’intensità della fluorescenza intracellulare, che viene monitorato in tempo reale utilizzando un lettore per micropiastre con lettura dal basso. In questa pratica procedura senza lavaggio, le cellule vengono incubate con il reagente del kit e trasferite nel lettore per piastre per essere valutate. Il saggio è ideale per l’uso in ambienti accademici o nell’industria biotecnologica e farmaceutica per applicazioni di ricerca, sviluppo di saggi e screening.

    Flusso di lavoro per i neurotrasmettitori

    Flusso di lavoro per i trasportatori di neurotrasmettitori

    Per maggiori dettagli, consultate il foglietto illustrativo del kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori, a cui è possibile accedere attraverso la Knowledge Base di Molecular Devices.

Opzioni per ordinare il kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori

Kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori

Kit di valutazione - PN: R6138

  • 1 flaconcino = 1 piastra x 2 flaconcini ciascuno

#R6138

$175.00 USD

1

Kit di esame - PN: R8173

  • 1 flaconcino = 1 piastra x 5 flaconcini

#R8173

$671.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8174

  • 1 flaconcino = 10 piastre x 5 flaconcini

#R8174

$4,798.00 USD

1

Risorse del kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori

Prodotti e servizi compatibili del kit del saggio di captazione dei trasportatori dei neurotrasmettitori