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Kit del saggio di western blot ScanLater

Il kit del saggio di western blot ScanLater™ fornisce un metodo basato sulla fluorescenza a tempo risolto (Time-Resolved Fluorescence, TRF), che è ottimale per la quantificazione di campioni contenenti quantità minime di proteine, nell’ordine dei femtogrammi. Questo nuovo metodo di western blot offre ai ricercatori i seguenti vantaggi:

  • Rilevazione basata sulla fluorescenza a tempo risolto
  • Anticorpi di capra anti-coniglio, di capra anti-topo, di asino anti-ratto, di asino anti-capra marcati con europio o anticorpi marcati con streptavidina
  • Possibilità di utilizzare membrane in nitrocellulosa e in PVDF
  • Eccitazione a 340/80 nm con emissione nell’intervallo 616/10 nm
  • Ottimizzato per l’uso con la cartuccia di rilevazione di western blot ScanLater per i lettori multimodali SpectraMax® i3, i3x e Paradigm®
  • Ottimizzato per l’uso con il modulo potenziato di rilevazione della TRF per il lettore per micropiastre multimodale SpectraMax iD5
  • Eliminazione di passaggi di aggiunta di substrato dipendenti dal tempo
  • Stabilità del segnale del blot di almeno un mese
  • Aumento della sensibilità del saggio mediante l’uso di un metodo basato sulla TRF per ridurre il rumore di fondo
  • Sensibilità per le proteine nell’ordine dei femtogrammi o picogrammi, simile a quella dei sistemi di rilevazione di western blot tradizionali

Dati sul kit del saggio di western blot ScanLater

  • Stabilità del segnale nel tempo

    Stabilità del segnale nel tempo

    I risultati dimostrano la stabilità del segnale ottenuto con il sistema del saggio ScanLater. Tre diluizioni di transferrina sono state separate mediante elettroforesi, trasferite su una membrana Immobilon FL e saggiate con un anticorpo di coniglio anti-transferrina. I blot sono stati incubati con gli anticorpi secondari anti-coniglio ScanLater marcati con Eu. Le misurazioni del segnale sulla membrana sono state eseguite il giorno 1 e il giorno 30. I risultati sono relativi a diluizioni seriali 1:3 di transferrina in tampone del campione 1x caricate su un gel con gradiente 4-20% e sottoposte a corsa elettroforetica per 30 min. Le proteine sono state trasferite su una membrana Immobilon FL e saggiate con anticorpi di coniglio anti-transferrina per tutta la notte a 4 °C, dopodiché è stata eseguita l’incubazione con IgG anti-coniglio marcate con europio per 1 ora. I blot sono stati lavati, essiccati e sottoposti a scansione nella stessa giornata e dopo un mese utilizzando un lettore SpectraMax Paradigm.

  • Stabilità del segnale dopo molteplici scansioni

    I risultati evidenziano la stabilità del segnale degli anticorpi secondari ScanLater marcati con Eu dopo 7 misurazioni successive sulla stessa membrana. Questi dati dimostrano la stabilità delle IgG anti-coniglio marcate con europio dopo 7 scansioni con il lettore SpectraMax Paradigm.

    Stabilità del segnale dopo molteplici scansioni

  • Rilevazione di quantità in tracce della forma endogena fosforilata di pChk1

    Rilevazione della forma fosforilata di pChk1 in cellule HEK 293 trattate con la sostanza cancerogena MMS e radiazioni UV (Università di Stanford).

  • Rilevazione di quantità in tracce della forma endogena fosforilata di JNK1

    Rilevazione della forma fosforilata di JNK1 in cellule NHLF (fibroblasti polmonari umani normali, Natural Human Lung Fibroblast) trattate con farmaci stimolanti e inibitori.

    Rilevazione di quantità in tracce della forma endogena fosforilata di JNK1

  • Confronto del sistema per western blot ScanLater con la rilevazione di western blot in chemiluminescenza

    Confronto del sistema per western blot ScanLater con la rilevazione di western blot in chemiluminescenza

    Rilevazione della forma ubiquitinata di Rad-18 in cellule HEK 293 trattate con diverse concentrazioni (0, 50, 100 ppm) dell’agente alchilante cancerogeno MMS. Sono stati ottenuti risultati paragonabili utilizzando il sistema per western blot ScanLater o eseguendo un western blot in chemiluminescenza (Università di Stanford).

Tecnologia del kit del saggio di western blot ScanLater

  • Durata di emissione della fluorescenza di fondo

    Durata di emissione della fluorescenza di fondo

    Rappresentazione schematica della durata di emissione della fluorescenza di fondo e dell’Eu chelato, che mostra il principio di misurazione della TRF. Il segnale viene misurato dopo un intervallo di tempo appropriato per ridurre l’autofluorescenza.

    Spettri di eccitazione e di emissione dell’europio chelato

    Spettri di eccitazione e di emissione dell’europio chelato

    Rappresentazione schematica degli spettri di eccitazione e di emissione dell’europio chelato

  • Principio del saggio di western blot ScanLater

    Principio del saggio di western blot ScanLater

    Lo schema del metodo di rilevazione delle proteine mostra che l’anticorpo secondario è marcato direttamente con europio.

    Flusso di lavoro per il saggio di western blot ScanLater

    Flusso di lavoro per il saggio di western blot ScanLater

    Fate clic qui per ingrandire l’immagine.

Opzioni per ordinare il kit del saggio di western blot ScanLater

ScanLater: Kit Eu-streptavidina

Kit di valutazione - PN: R8200

  • Streptavidina marcata con europio (20 μg)
  • Tampone di bloccaggio (40 ml)
  • Tampone di lavaggio (100 ml)
  • Per 10 minigel con il protocollo raccomandato

#R8200

$330.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8203

  • Streptavidina marcata con europio (60 μg)
  • Tampone di bloccaggio (120 ml)
  • Tampone di lavaggio (300 ml)
  • Per 30 minigel con il protocollo raccomandato

#R8203

$704.00 USD

1

ScanLater: Kit anti-topo

Kit di valutazione - PN: R8201

  • Anticorpo di capra anti-topo marcato con europio (20 μg)
  • Tampone di bloccaggio (40 ml)
  • Tampone di lavaggio (100 ml)
  • Per 10 minigel con il protocollo raccomandato

#R8201

$330.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8205

  • Anticorpo di capra anti-topo marcato con europio (60 μg)
  • Tampone di bloccaggio (120 ml)
  • Tampone di lavaggio (300 ml)
  • Per 30 minigel con il protocollo raccomandato

#R8205

$704.00 USD

1

ScanLater: Kit anti-coniglio

Kit di valutazione - PN: R8202

  • Anticorpo di capra anti-coniglio marcato con europio (20 μg)
  • Tampone di bloccaggio (40 ml)
  • Tampone di lavaggio (100 ml)
  • Per 10 minigel con il protocollo raccomandato

#R8202

$330.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8204

  • Anticorpo di capra anti-coniglio marcato con europio (60 μg)
  • Tampone di bloccaggio (120 ml), tampone di lavaggio (300 ml)
  • Per 30 minigel con il protocollo raccomandato

#R8204

$704.00 USD

1

ScanLater: Kit anti-capra

Kit di valutazione - PN: R8224

  • Anticorpo di asino anti-capra marcato con europio (20 μg)
  • Tampone di bloccaggio (40 ml)
  • Tampone di lavaggio (100 ml)
  • Per 10 minigel con il protocollo raccomandato

#R8224

$319.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8227

  • Anticorpo di asino anti-capra marcato con europio (60 μg)
  • Tampone di bloccaggio (120 ml)
  • Tampone di lavaggio (300 ml)
  • Per 30 minigel con il protocollo raccomandato

#R8227

$671.00 USD

1

ScanLater: Kit anti-ratto

Kit di valutazione - PN: R8225

  • Anticorpo di asino anti-ratto marcato con europio (20 μg)
  • Tampone di bloccaggio (40 ml)
  • Tampone di lavaggio (100 ml)
  • Per 10 minigel con il protocollo raccomandato

#R8225

$319.00 USD

1

Kit di materiale sfuso - PN: R8228

  • Anticorpo di asino anti-ratto marcato con europio (60 μg)
  • Tampone di bloccaggio (120 ml)
  • Tampone di lavaggio (300 ml)
  • Per 30 minigel con il protocollo raccomandato

#R8228

$671.00 USD

1

Marcatore di peso molecolare delle proteine per western blot ScanLater

Marcatore di peso molecolare delle proteine - PN: R8220

  • 7 proteine ricombinanti biotinilate di 10, 20, 40, 60, 80, 100 e 140 kD
  • 3 proteine marker precolorate di 18, 31 e 70 kD
  • Pronto per l’uso, per 30 minigel con il protocollo raccomandato

#R8220

$319.00 USD

1

Risorse del kit del saggio di western blot ScanLater