Amplificatori per patch-clamp Axon Instruments

Qual è il miglior amplificatore per la registrazione delle sezioni?

L’amplificatore MultiClamp 700B è il più adatto alla vostra applicazione. È dotato di due testate ed è ideale per la registrazione sia in voltage-clamp che in current-clamp.

È possibile passare automaticamente dalla modalità voltage a quella current clamp nell’amplificatore MultiClamp 700B?

Sì, è possibile. La funzione di commutazione automatica della modalità nell’amplificatore MultiClamp 700B consente di passare automaticamente dalla modalità voltage a quella current clamp o viceversa. È necessario attivare la casella di spunta della commutazione di modalità sul software Commander.

Come si ottiene un “nuovo inizio” per il software Commander del MultiClamp 700B?

Nella riga superiore del software commander del MultiClamp 700B è presente un elenco di icone. La quinta icona è il pulsante Ripristina impostazioni predefinite del programma. Fare clic su questo pulsante per ripristinare le impostazioni predefinite del software Commander del MultiClamp 700B.

La spia di sovraccarico si accende sul mio amplificatore quando la pipetta è immersa nella soluzione di bagno. Cosa devo fare?

La prima cosa da fare è sostituire il cavo/elettrodo di messa a terra o il pellet/filo dell’elettrodo di riferimento del bagno. Se si utilizza un ponte di agar come elettrodo di massa/riferimento, sostituirlo con uno nuovo. In secondo luogo, pulire il supporto dell’elettrodo. Smontare il supporto dell’elettrodo, sciacquare tutte le parti in acqua distillata più volte, asciugare accuratamente tutte le parti del supporto dell’elettrodo e riassemblare.

Che cos’è il potenziale di giunzione liquido? Come si forma in un esperimento di patch-clamp? È opportuno correggerlo o no?

Quando due soluzioni con concentrazioni e mobilità ioniche diverse vengono a contatto, si forma un potenziale di giunzione liquido (Liquid Junction Potential, LJP) tra queste due soluzioni. Ciò avviene quando la pipetta del patch entra in contatto con la soluzione di bagno. Quando la pipetta patch viene inserita per la prima volta nel bagno, ci sono degli offset di voltaggio che vengono corretti dall’amplificatore quando la corrente viene azzerata (ossia in modalità voltage-clamp). Gli offset sono costituiti da LJP e differenze di potenziale tra gli elettrodi solidi e le soluzioni con cui sono a contatto.

Dopo aver ottenuto una tenuta ad alta resistenza (gigaseal) con la membrana, la soluzione della pipetta non è più in contatto diretto con la soluzione di bagno. Pertanto, il suo LJP scompare, ma l’offset dell’amplificatore di compensazione rimane. Pertanto, l’LJP deve essere preso in considerazione o meno per la correzione. L’ampiezza del potenziale di giunzione liquida tra due soluzioni dipende dalla differenza di concentrazione e mobilità ionica. Se è molto piccola, l’LJP potrebbe essere trascurato e non essere corretto. Tuttavia, se si tratta di un valore elevato, l’LJP non corretto potrebbe influenzare l’accuratezza delle misurazioni, come il diagramma IV e il potenziale di inversione. È assolutamente necessario correggerlo.