Imager CloneSelect (CSI e CSI FL)

Sviluppo di linee cellulari

Lo sviluppo di linee cellulari è una fase cruciale nel processo di generazione di molecole biofarmaceutiche, come gli anticorpi monoclonali. Il processo spesso ha inizio con la trasfezione del tipo della cellula ospite con il DNA che codifica per la proteina terapeutica di interesse in modo da ottenere l’integrazione casuale o diretta del DNA target nel genoma della cellula ospite. Viene eseguito lo screening di migliaia di cloni per isolare le rare cellule altamente produttive, un processo manuale che richiede molto tempo.

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Vitalità cellulare

Lo sviluppo di linee cellulari richiede la scoperta di cloni derivati da singole cellule che producano livelli elevati e costanti della proteina terapeutica target. Una prima fase cruciale del processo è l’isolamento di singole cellule vitali. Le singole cellule proliferano per formare colonie che possono essere valutate per la produttività della proteina terapeutica target. La vitalità e i tassi di crescita dei cloni derivati da singole cellule possono essere caratterizzati con l’imager CloneSelect e il lettore per micropiastre e citometro per imaging SpectraMax i3x.

• Generazione di curve di crescita e confluenza sull’imager CloneSelect
• Misurazione della vitalità cellulare e della citotossicità con il kit per l’integrità cellulare EarlyTox
• Saggi di vitalità cellulare e citotossicità in luminescenza
• Brochure: SpectraMax i3x

Saggio di formazione di colonie

Il saggio di formazione di colonie in agar molle è una nota tecnica classica per la caratterizzazione della capacità delle cellule di crescere in maniera indipendente dall’ancoraggio, una caratteristica della cancerogenesi. Dopo la semina in una matrice che favorisce la formazione di colonie, come un terreno semisolido, le cellule vengono solitamente incubate con composti che possono influire sulla crescita delle colonie. L’imager CloneSelect permette di acquisire immagini di ogni pozzetto e calcola automaticamente la confluenza, stima il numero e l’area delle colonie e monitora la loro crescita.

Migrazione cellulare senza marcatura

I saggi di cicatrizzazione delle ferite vengono utilizzati in una varietà di ambiti disciplinari per studiare la migrazione cellulare, il movimento coordinato di una popolazione cellulare. Viene creato un “graffio” manuale o standardizzato su un monostrato di cellule cresciute in micropiastre. Le micropiastre possono essere sottoposte a screening con una libreria per valutarne l’effetto sulla migrazione cellulare. Questo approccio permette di studiare l’effetto di una libreria di composti o di geni. L’imager CloneSelect permette l’imaging rapido (<90 s per piastra) e l’analisi obiettiva e automatizzata della migrazione cellulare. 

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Anticorpi monoclonali (mAb)

Gli anticorpi monoclonali (mAb) originano da una cellula parentale unica, legandosi così solo a un singolo epitopo. La scoperta di anticorpi monoclonali solitamente si riferisce allo screening e all’identificazione di anticorpi specifici diretti contro un epitopo specifico per la diagnosi e il trattamento di malattie, come il coronavirus per la COVID-19.

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Monoclonalità

Lo sviluppo di linee cellulari e la verifica della monoclonalità sono fasi cruciali nel processo di generazione di molecole biofarmaceutiche, come gli anticorpi monoclonali. In seguito all’isolamento di una singola cellula vitale che esprime in maniera robusta la proteina di interesse, può essere sviluppata una linea cellulare. Un requisito fondamentale in questo processo è la documentazione delle evidenze di clonalità. Generalmente, la documentazione della clonalità è basata su immagini e prevede l’acquisizione di un’immagine di una singola cellula da includere nella presentazione di richieste alle autorità regolatorie.

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