Serie CloneSelect Single-Cell Printer

Sviluppo di linee cellulari

Lo sviluppo di linee cellulari è una fase cruciale nel processo di generazione di molecole biofarmaceutiche, come gli anticorpi monoclonali. Il processo spesso ha inizio con la trasfezione del tipo della cellula ospite con il DNA che codifica per la proteina terapeutica di interesse in modo da ottenere l’integrazione casuale o diretta del DNA target nel genoma della cellula ospite. Viene eseguito lo screening di migliaia di cloni per isolare le rare cellule altamente produttive, un processo manuale che richiede molto tempo.

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Anticorpi monoclonali (mAb)

Gli anticorpi monoclonali (mAb) originano da una cellula parentale unica, legandosi così solo a un singolo epitopo. La scoperta di anticorpi monoclonali solitamente si riferisce allo screening e all’identificazione di anticorpi specifici diretti contro un epitopo specifico per la diagnosi e il trattamento di malattie, come il coronavirus per la COVID-19.

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Monoclonalità

Lo sviluppo di linee cellulari e la verifica della monoclonalità sono fasi cruciali nel processo di generazione di molecole biofarmaceutiche, come gli anticorpi monoclonali. In seguito all’isolamento di una singola cellula vitale che esprime in maniera robusta la proteina di interesse, può essere sviluppata una linea cellulare. Un requisito fondamentale in questo processo è la documentazione delle evidenze di clonalità. Generalmente, la documentazione della clonalità è basata su immagini e prevede l’acquisizione di un’immagine di una singola cellula da includere nella presentazione di richieste alle autorità regolatorie.

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Genomica di singole cellule

L’isolamento di singole cellule è ancora un’operazione problematica nell’analisi genomica di singole cellule. I modelli attuali non forniscono evidenze a supporto del fatto che è stata isolata una singola cellula nel recipiente usato per l’analisi. È importante assicurare l’integrità delle cellule prima della lisi per preservare il loro DNA.

Inoltre, le cellule devono essere sottoposte al minore stress possibile prima della lisi per preservare il loro RNA e il loro livello di espressione. La serie CloneSelect Single-Cell Printer deposita singole cellule in maniera molto delicata, assicurando alti livelli di purezza e un’elevata vitalità.

Ciò fornisce una base ottimale per la successiva analisi genomica di singole cellule.

Separazione di singole cellule

Lo sviluppo di linee cellulari richiede la scoperta di cloni derivati da singole cellule che producano livelli elevati e costanti della proteina terapeutica target. La prima fase del processo è costituita dall’isolamento di singole cellule vitali. Il metodo della diluizione limite è una tecnica basata sulla probabilità statistica, ma richiede molto tempo. Il CloneSelect Single-Cell Printer permette l’isolamento delicato delle cellule in modo da massimizzare la vitalità cellulare, fornendo inoltre evidenze dirette della clonalità attraverso una serie di cinque immagini acquisite durante la dispensazione delle cellule.

• Un flusso di lavoro basato sulla tecnologia microfluidica per la dispensazione di singole cellule e l’imaging delle micropiastre, ottimizzato per offrire efficienza, vitalità e un rapporto sulla monoclonalità
• Un flusso di lavoro che combina l’isolamento di singole cellule e l’imaging delle micropiastre migliora l’efficienza di clonaggio offrendo maggiori garanzie di clonalità
• Scheda tecnica: CloneSelect Single-Cell Printer