CMax Plus 光吸收微孔板读板机

Assorbanza

Imparate ogni aspetto della rilevazione dell'assorbanza, come funziona, in che modo si misura e come si può usare per calcolare la concentrazione. Forniamo inoltre informazioni sulle comuni applicazioni e saggi in assorbanza, inclusi gli ELISA, la quantificazione delle proteine e degli acidi nucleici, e la crescita microbica.

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Saggi di vitalità cellulare, di proliferazione cellulare, di citotossicità (MTT, XTT, MTS)

I saggi colorimetrici che impiegano sali di tetrazolio come MTT, XTT e MTS possono essere usati per misurare la proliferazione cellulare e la citotossicità. Per esempio, il saggio MTT dipende dalla riduzione di MTT da parte di enzimi presenti nelle cellule vitali per formare un prodotto di blu formazano che può essere quantificato misurando l'assorbanza. La scelta del saggio può basarsi sul flusso di lavoro desiderato e sul tempo richiesto.

Per avere informazioni su alcune di queste metodiche leggere la nota applicativa:

• Valutate la vitalità e proliferazione cellulare con letture colorimetriche

ELISA

I saggi di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) si usano per misurare la quantità di una specifica proteina, generalmente tramite un formato a micropiastre, e nella maggior parte dei casi i risultati vengono rilevati mediante letture di assorbanza nell'intervallo di lunghezze d'onda del visibile. I formati ELISA chemioluminescenti e fluorescenti offrono un aumento della sensibilità per una quantificazione accurata degli analiti meno abbondanti.

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Rilevazione, quantificazione e analisi delle proteine

La rilevazione, la quantificazione e l’analisi delle proteine sono fondamentali per l'indagine di una vasta gamma di processi biologici. La misurazione della concentrazione delle proteine è necessaria in processi che vanno dalla purificazione e marcatura delle proteine alla preparazione dei campioni per l’elettroforesi. Le proteine possono essere quantificate direttamente mediante la misurazione dell’assorbanza a 280 nm oppure indirettamente utilizzando metodi colorimetrici (BCA, Bradford, ecc.) o fluorimetrici che offrono vantaggi come una maggiore sensibilità. Per identificare e misurare una specifica proteina in un campione complesso, ad esempio siero o un lisato cellulare, è possibile utilizzare un saggio ELISA.

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