Lettori per micropiastre Gemini XPS ed EM

Saggi per il cAMP (GPCR)

Il monitoraggio dei livelli di cAMP, un secondo messaggero prodotto in risposta all'attivazione della adenilato ciclasi, rappresenta una delle modalità più comuni per screenare a favore di agonisti e antagonisti dei recettori accoppiati a proteina Gi/Gs. I livelli di cAMP possono essere monitorati usando molecole fluorescenti che si legano al cAMP e vengono rilevate usando un lettore per piastre in fluorescenza.

Ecco alcune note applicative sui saggi per il cAMP (GPCR) che possono essere di vostro interesse:

• Soluzione completa per il flusso di lavoro per il cAMP usando il kit di saggio fluorescente per il cAMP CatchPoint
• Saggio HTRF cAMP HiRange sui lettori per micropiastre SpectraMax Multi-Mode

Saggi per l'apoptosi con caspasi-3

L'apoptosi è un programma cellulare altamente regolato che determina morte cellulare in processi normali come per esempio lo sviluppo embrionale, come anche malattie tra cui il cancro e le condizioni neurodegenerative. I saggi per l'apoptosi possono essere eseguiti utilizzando una serie di sistemi di rilevazione tramite imaging o lettori per micropiastre e forniscono informazioni preziose sui meccanismi di morte cellulare normali e correlati a malattia.

Scoprite un saggio omogeneo, in un unico passaggio, per la caspasi-3 disegnato specificamente per i lettori per micropiastre:

• Kit di saggio EarlyTox Caspase-3/7 R110 su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax

Salute cellulare

La vitalità cellulare si riferisce al numero di cellule sane in una popolazione e può essere valutata usando saggi che misurano l’attività enzimatica, l’integrità della membrana cellulare, la produzione di ATP e altri indicatori. Queste metodiche possono utilizzare letture in luminescenza, in fluorescenza o colorimetriche come indicatori della vitalità cellulare generale o anche di specifiche vie cellulari. I saggi di citotossicità e vitalità cellulare vengono spesso utilizzati per valutare l’effetto di un farmaco o di un altro trattamento e rappresentano validi strumenti nella ricerca di nuovi composti terapeutici; inoltre, permettono di approfondire la comprensione del funzionamento delle cellule normali.

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Saggi di proliferazione cellulare

La quantificazione della proliferazione cellulare usando la fluorescenza permette di monitorare agevolmente gli effetti dei farmaci e di altri trattamenti sperimentali sulla crescita cellulare.

Questa nota applicativa illustra due metodiche di saggio di una proliferazione cellulare. Nella prima, la proliferazione cellulare viene quantificata usando una curva standard basata su cellule. Nella seconda, la proliferazione cellulare viene quantificata usando campioni cellulari trattati con RNasi e una curva standard di DNA.

• Misurazione della proliferazione cellulare usando il saggio di proliferazione cellulare CyQUANT Cell con i lettori per micropiastre SpectraMax

Saggi di citotossicità

Lo sviluppo di saggi in vitro predittivi adatti per la valutazione di sicurezza e di efficacia è di elevato interesse per migliorare il processo di sviluppo farmacologico e ridurre il tasso di abbandono dei farmaci. Vi è grande interesse nell'utilizzo delle cellule staminali come strumenti per lo screening dei composti durante le prime fasi dello sviluppo dei farmaci.

In questo poster scientifico presentiamo i risultati ottenuti da uno dei nostri lettori per piastre multimodali per eseguire una valutazione di tossicità di vari composti usando modelli cellulari derivati dalle cellule staminali secondo una modalità ad alto rendimento:

• Saggi ad alto rendimento basati su cellule per la valutazione della tossicità usando il lettore per piastre SpectraMax^® Paradigm

Kit di saggio della vitalità cellulare EarlyTox

I saggi di vitalità cellulare sono fondamentali per un ampio spettro di aree di ricerca che spaziano dall'indagine dei meccanismi di morte cellulare allo sviluppo di nuovi composti terapeutici mirati all'apoptosi nelle malattie. Una delle tecnologie di rilevazione più diffuse per la vitalità cellulare è un lettore per micropiastre a fluorescenza.

Ecco alcune applicazioni che possono essere di vostro interesse:

• Misurazione della morte cellulare sul lettore SpectraMax iD3 con saggi di vitalità cellulare
• Kit di saggio EarlyTox Live/Dead su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax
• Kit di saggio EarlyTox Caspase-3/7 R110 su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax
• Kit di saggio del glutatione EarlyTox su lettori per micropiastre in fluorescenza SpectraMax

ELISA

I saggi di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) si usano per misurare la quantità di una specifica proteina, tramite un formato a micropiastre, e nei casi più frequenti i risultati vengono rilevati con l'assorbanza nell'intervallo di lunghezze d'onda del visibile. I formati ELISA chemioluminescenti e fluorescenti offrono un aumento della sensibilità per una quantificazione accurata degli analiti meno abbondanti.

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Fluorescenza

Scoprite ogni aspetto della rilevazione in fluorescenza, cos'è, come funziona e gli strumenti usati per misurare la fluorescenza di un campione. Disponiamo inoltre di numerosi saggi basati sulla fluorescenza, tra cui la vitalità cellulare, l'attività GPCR e la quantificazione fluorescente degli acidi nucleici.

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Rilevazione delle proteine fluorescenti

Le proteine fluorescenti hanno trovato straordinaria diffusione come strumenti per monitorare gli eventi biologici in vivo. In aggiunta alla proteina fluorescente nel verde (GFP) della medusa Aequorea victoria, sono ora disponibili numerose altre proteine ricavate da altre specie di medusa e di coralli della barriera corallina. Queste proteine possono essere espresse in una svariata gamma di cellule e organismi, dove si usano per tracciare numerosi processi cellulari, tra cui la sintesi proteica e la traslocazione, l'induzione genica e le linee cellulari.

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Quantificazione di proteine fluorescenti

Le proteine dentro le cellule eucariotiche esistono in uno stato dinamico, in un equilibrio altamente regolato tra sintesi e degradazione. Benché la sintesi proteica sia ben compresa dopo decenni di studio, i principali progressi nella conoscenza della degradazione delle proteine si sono verificati solo nel corso degli ultimi due decenni.

Scoprite la proteina fluorescente nella nostra nota applicativa:

• Misurazione dell'inibizione del proteosoma in cellule vive sui lettori per micropiastre Analyst® GT, FLEXstation® e Gemini EM usando il sensore per proteosoma di BD Biosciences
• Utilizzo del kit per le proteine NanoOrange con i lettori per micropiastre SpectraMax

Microbiologia e contaminanti

Si stima che i microbi, compresi i batteri, rappresentino circa il 15 percento della biomassa esistente sulla terra e i microbi presenti nel corpo umano sono 10 volte più numerosi delle cellule umane. Questi microrganismi ci offrono notevoli benefici e sono anche vitali per numerosi campi di ricerca, dalla medicina alla produzione di energia alternativa. In compenso, per garantire la sicurezza dei prodotti farmaceutici, i microbi e le sostanze tossiche che essi producono devono essere monitorati. Gli scienziati le cui ricerche sono basate sull’uso di cellule di mammifero devono monitorare attentamente queste colture per rilevare eventuali contaminanti microbici indesiderati allo scopo di garantire l’affidabilità dei risultati sperimentali ottenuti.

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Quantificazione e analisi degli acidi nucleici (DNA/RNA)

Gli acidi nucleici sono grandi molecole biologiche comuni a tutte le forme di vita note. L'acido desossiribonucleico (DNA) è costituito da un doppio filamento di coppie di nucleotidi, mentre generalmente l’acido ribonucleico (RNA) è formato da un singolo filamento. I nucleotidi che compongono il DNA sono l’adenina, la citosina, la guanina e la timina, mentre l’RNA contiene uracile al posto della timina. Il DNA costituisce il materiale genetico di tutti gli organismi e codifica le informazioni di cui le cellule hanno bisogno per sintetizzare le proteine.

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Rilevazione, quantificazione e analisi delle proteine

La rilevazione, la quantificazione e l’analisi delle proteine sono fondamentali per l'indagine di una vasta gamma di processi biologici. La misurazione della concentrazione delle proteine è necessaria in processi che vanno dalla purificazione e marcatura delle proteine alla preparazione dei campioni per l’elettroforesi. Le proteine possono essere quantificate direttamente mediante la misurazione dell’assorbanza a 280 nm oppure indirettamente utilizzando metodi colorimetrici (BCA, Bradford, ecc.) o fluorimetrici che offrono vantaggi come una maggiore sensibilità. Per identificare e misurare una specifica proteina in un campione complesso, ad esempio siero o un lisato cellulare, è possibile utilizzare un saggio ELISA.

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Rilevazione del triptofano

La fluorescenza intrinseca delle proteine si deve agli amminoacidi aromatici triptofano, tirosina e fenilalanina. Il triptofano domina l'emissione delle proteine ed è il più sensibile alla polarità del solvente e all'ambiente locale. L'analisi delle variazioni di fluorescenza del triptofano può restituire informazioni sulla denaturazione e conformazione delle proteine.

In queste note applicative dimostriamo il rendimento dei lettori per piastre multimodali SpectraMax® per saggi in cui viene misurata la fluorescenza intrinseca del triptofano.

• Misurate la fluorescenza intrinseca del triptofano sul lettore per micropiastre SpectraMax iD3
• Rilevazione intrinseca del triptofano con la piattaforma per micropiastre multimodale SpectraMax i3