Luminescenza
Cos’è la luminescenza?
La luminescenza è l’emissione di luce da parte di una sostanza come risultato di una reazione chimica (chemiluminescenza) o di una reazione enzimatica (bioluminescenza).
La rilevazione della luminescenza è otticamente più semplice della rilevazione della fluorescenza in quanto non richiede una sorgente luminosa o un’ottica specifica per l’eccitazione.
Figura 1 - Reazione di tipo “flash” o “glow”
La luminescenza può essere determinata da una reazione di tipo “flash” o “glow”, a seconda dei profili cinetici. La luminescenza in modalità “flash” fornisce un segnale molto luminoso per un breve lasso di tempo, di solito secondi. La luminescenza in modalità “glow” emette un segnale più stabile, ma solitamente meno intenso, che può durare diversi minuti o ore. La luminescenza in modalità “flash” richiede generalmente un sistema di rilevazione con iniettori in grado di fornire il substrato alla reazione poco prima dell’esecuzione di una misurazione in modo che il segnale non venga perso. Generalmente per la luminescenza sono raccomandate micropiastre bianche, perché riflettono la luce e massimizzano il segnale (si veda la Figura 1).
Vantaggi della luminescenza
La luminescenza è una piattaforma di rilevazione estremamente diffusa, utilizzata in un maggior numero di applicazioni rispetto all’assorbanza e alla fluorescenza. Generalmente offre un intervallo dinamico più ampio e una maggiore sensibilità poiché l’interferenza di fondo (autofluorescenza di composti, terreni di coltura e cellule) è bassa. Inoltre, i saggi in luminescenza spesso utilizzano un protocollo omogeneo (senza lavaggio), che li rende più semplici da automatizzare per applicazioni ad alto rendimento.