Flusso di lavoro per lo sviluppo di linee cellulari

Sviluppo di linee cellulari per la produzione di proteine ricombinanti

Per ottenere rese elevate di prodotti proteici ricombinanti, le tipiche piattaforme di elezione sono linee cellullari come le CHO, gli ibridomi o le HEK 293. Il processo di sviluppo di linee cellulari stabili inizia con la trasfezione di cellule ospiti (CHO o HEK 293) con plasmidi ricombinanti o la fusione cellulare nel caso degli ibridomi. Dopo la trasfezione o la fusione cellulare, un elevato numero di cloni viene sottoposto a screening e selezionato sulla base dell’espressione della proteina di interesse (farmaci biologici terapeutici). Una volta identificati i cloni candidati, ognuno di essi viene confermato, validato e caratterizzato utilizzando il sequenziamento del DNA e una varietà di saggi analitici a valle. Al termine, la produzione dei cloni di interesse viene ampliata e aumentata e hanno luogo bioprocessi a valle.

Fasi di un tipico processo di sviluppo di linee cellulari

Flusso di lavoro per la generazione di proteine ricombinanti

1. Trasfezione - Trasfettare le cellule ospiti con plasmidi ricombinanti codificanti per una proteina di interesse.
2. Selezione del pool di cellule trasfettate - Selezionare le cellule che sono stabili e producono la proteina di interesse.
3. Screening e selezione dei cloni - Eseguire lo screening e la selezione dei cloni che presentano un’espressione elevata della proteina di interesse.
4. Caratterizzazione della linea cellulare - Validare e caratterizzare ciascun clone per quanto riguarda la stabilità e la produttività.
5. Espansione e valutazione a valle - Procedere all’espansione dei cloni ed eseguire i bioprocessi a valle. Si provvede anche alla conservazione delle cellule.

Risorse in primo piano per l’ottimizzazione dei flussi di lavoro per lo sviluppo di linee cellulari

Risorse per il flusso di lavoro per lo sviluppo di linee cellulari

Prodotti e servizi correlati