Rilevazione, quantificazione e analisi delle proteine
Ottimizzate il processo di quantificazione delle proteine
Rilevazione, quantificazione e analisi delle proteine
La rilevazione, la quantificazione e l’analisi delle proteine sono fondamentali per lo studio di una vasta gamma di processi biologici. La misurazione della concentrazione delle proteine è necessaria in processi che vanno dalla purificazione e marcatura delle proteine alla preparazione dei campioni per l’elettroforesi.
La quantificazione delle proteine è la misurazione della concentrazione totale di proteine presente in un campione. Le proteine possono essere quantificate direttamente mediante la misurazione dell’assorbanza a 280 nm oppure indirettamente utilizzando metodi colorimetrici (BCA, Bradford, ecc.) o fluorimetrici che offrono vantaggi come una maggiore sensibilità. Per identificare e misurare una specifica proteina in un campione complesso, ad esempio siero o un lisato cellulare, è possibile utilizzare un saggio di immunoassorbimento enzimatico (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA).
È possibile analizzare la trasduzione del segnale cellulare e altri processi biologici mediante l’uso di proteine fluorescenti. Ad esempio, la proteina fluorescente verde (Green Fluorescent Protein, GFP) può essere espressa in cellule vive e utilizzata per visualizzare la localizzazione e la dinamica delle proteine in condizioni sperimentali. Il triptofano, un aminoacido le cui proprietà di emissione di fluorescenza sono influenzate dal microambiente, è stato utilizzato per ottenere informazioni sulle modifiche dello stato conformazionale delle proteine.
Quantificazione delle proteine e metodi di analisi
I lettori per micropiastre con modalità di rilevazione dell’assorbanza, della fluorescenza e della luminescenza rappresentano una soluzione versatile per la quantificazione e lo studio delle proteine. Le nostre note applicative illustrano come possono essere utilizzati questi strumenti per ottenere e analizzare i risultati.