COLTIVAZIONE DEGLI SFEROIDI
Le cellule 3D possono essere coltivate direttamente in una piastra ULA a fondo tondo per favorire lo sviluppo della tipica forma sferica di uno sferoide. Le cellule possono anche essere coltivate in altri contenitori, come piastre di Petri, fiasche o altre micropiastre prima di essere trasferite in una micropiastra per imaging.
Piastre a 96 o 384 pozzetti
La maggior parte delle colture cellulari 3D per screening ad alto contenuto e ad alto rendimento vengono eseguite utilizzando micropiastre a 96 o 384 pozzetti. Le micropiastre ULA a fondo a U/tondo permettono che gli sferoidi assumano la loro forma sferica; in alternativa, gli sferoidi possono anche essere coltivati in micropiastre a fondo piatto utilizzando idrogel per simulare le matrici extracellulari (MEC). I protocolli ottimizzati per le colture cellulari di sferoidi per il sistema di imaging ad alto contenuto ImageXpress® Micro Confocal possono utilizzare piastre a 96 e 384 pozzetti ULA a fondo a U con una procedura di colorazione in un unico passaggio che riduce la durata del saggio e minimizza la variabilità.
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TRATTAMENTO CON COMPOSTI
Dopo la formazione degli sferoidi, i composti vengono aggiunti nei pozzetti e poi incubati per uno o più giorni, a seconda del meccanismo in studio. Generalmente, gli esperimenti sull’apoptosi sono più brevi, mentre gli studi multiparametrici sulla citotossicità hanno una durata maggiore. Per i trattamenti farmacologici che richiedono più tempo, i composti vengono rinnovati periodicamente durante l’incubazione. La concentrazione dei composti e il periodo di incubazione dipendono dal protocollo desiderato.
COLORAZIONE PER MARCATORI
Dopo il completamento del trattamento con i composti, vengono aggiunti coloranti direttamente nel terreno di coltura. È possibile utilizzare coloranti che non richiedono lavaggi per evitare di disturbare gli sferoidi, ma questi possono essere lavati con attenzione, anche con l’uso di sistemi automatizzati, se necessario.
Kit del saggio
Kit del saggio affidabili e facili da utilizzare per la ricerca nel campo delle scienze naturali, la scoperta e lo sviluppo di farmaci e i saggi biologici. I nostri kit del saggio sono ottimizzati per l’uso sui nostri strumenti. Approfittate della possibilità di sottoporre a screening un maggior numero di composti in una fase più precoce del processo di scoperta farmacologica e di caratterizzare un profilo concentrazione-risposta completo dei composti in esame per studiare la vitalità cellulare, la proliferazione cellulare, la formazione di assoni e altro ancora.
Sistema di imaging ad alto contenuto
Il sistema ImageXpress Micro Confocal è un’esclusiva soluzione per imaging confocale che permette di acquisire immagini di oltre un milione di pozzetti alla settimana. Il software MetaXpress consente l’acquisizione 3D su piani multipli (z-stack). Le immagini ottenute sui piani Z possono essere salvate individualmente o compresse in una singola proiezione 2D utilizzando un algoritmo matematico.
ACQUISIZIONE DI IMMAGINI CELLULARI 3D
È possibile acquisire singole immagini o una serie di immagini a profondità diverse (z-stack) all’interno del corpo degli sferoidi utilizzando apparecchiature di imaging specializzate.
ANALISI DELLE IMMAGINI CELLULARI 3D
Utilizzare un software di analisi dell’imaging cellulare per eseguire un’analisi quantitativa delle immagini delle cellule allo scopo di monitorare l’espressione di marcatori diversi e quantificare le letture biologiche.
Software di imaging ad alto contenuto
Il software di acquisizione e analisi delle immagini ad alto contenuto MetaXpress è uno strumento di analisi multilivello per un’ampia gamma di applicazioni 2D e 3D ottimizzato per il sistema ImageXpress Micro Confocal. I moduli applicativi integrati di acquisizione e analisi per modelli cellulari 3D semplificano la quantificazione ad alto rendimento delle strutture 3D con misurazioni di volume, intensità e distanza.