Seminare le cellule aderenti o in sospensione nel contenitore prescelto, ad esempio piastre di coltura, vetrini multipozzetto e micropiastre. Incubare le cellule nelle condizioni di coltura normali (ossia 37 °C, 5% di CO2). Per le cellule aderenti, l’incubazione notturna delle cellule seminate fornirà loro il tempo necessario per attaccarsi e crescere.
Per la maggior parte delle colture cellulari per screening ad alto contenuto e ad alto rendimento vengono utilizzate micropiastre a 96 o 384 pozzetti.
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Kit del saggio della vitalità cellulare EarlyTox
Se necessario per il protocollo, trattare le cellule con i composti di interesse.
I composti possono essere aggiunti alle cellule per un periodo compreso tra pochi minuti e vari giorni a seconda del meccanismo d’azione dei composti e della risposta biologica in studio. Ad esempio, i saggi di apoptosi e di internalizzazione dei recettori richiedono generalmente tempi di incubazione più brevi, mentre per i saggi di citotossicità multiparametrici occorrono periodi più lunghi. Nel caso di trattamenti prolungati, può essere necessario sostituire i composti durante l’incubazione.
Le cellule vive possono essere colorate con una varietà di fluorofori o essere trasfettate/trasdotte con costrutti contenenti proteine di fusione con peptidi fluorescenti. Per la colorazione occorre seguire le istruzioni del produttore. La colorazione non è necessaria per tutte le applicazioni su cellule vive; esistono tecniche di imaging e analisi senza marcatura che permettono di seguire e monitorare le cellule utilizzando la sola microscopia in campo chiaro.
Kit del saggio affidabili e facili da utilizzare per la ricerca nel campo delle scienze naturali, la scoperta e lo sviluppo di farmaci e i saggi biologici. I nostri kit del saggio sono ottimizzati per l’uso sui nostri strumenti. Approfittate della possibilità di sottoporre a screening un maggior numero di composti in una fase più precoce del processo di scoperta farmacologica e di caratterizzare un profilo concentrazione-risposta completo dei composti in esame.
I nostri sistemi per imaging e analisi ad alto contenuto offrono soluzioni scalabili flessibili, facilitando l’evoluzione del vostro sistema di pari passo con le vostre attività di ricerca. Sono provvisti di opzioni e moduli per soddisfare le vostre specifiche esigenze di ricerca, compresi obiettivi, filtri, modalità di imaging e condizioni ambientali.
Per le acquisizioni in time-lapse continuo, configurare la durata totale della serie temporale e gli intervalli di imaging, ad es. acquisizione di immagini ogni ora per 24 ore.
È possibile eseguire acquisizioni in time-lapse discontinuo, che prevedono che la piastra venga prelevata e rimessa nell’incubatore e sottoposta a imaging in vari momenti diversi.
Analizzare le immagini con il software di analisi per imaging cellulare per generare letture multiparametriche per le risposte biologiche in studio. È possibile generare ed esaminare dati cinetici per le acquisizioni in time-lapse.
Il software di acquisizione e analisi delle immagini ad alto contenuto MetaXpress® è una soluzione completa per l’analisi ad alto contenuto che offre un flusso di lavoro integrato rigorosamente orchestrato. La gamma di moduli applicativi supporta una varietà di esigenze, dalla facilità d’uso alla progettazione brevettata di saggi. Il software include strumenti potenti ed eleganti per l’imaging 2D e 3D come l’analisi in time-lapse. Grazie alla nostra procedura guidata di impostazione dell’acquisizione, è possibile generare dati in pochi minuti.