Imaging e analisi cellulare
Acquisizione e analisi di dati quantitativi per applicazioni su modelli basati su cellule
Imaging cellulare: Acquisizione e analisi
I ricercatori hanno a disposizioni varie opzioni per quanto riguarda i metodi di imaging cellulare, dalla microscopia a contrasto di fase che mostra le cellule intatte all’imaging a fluorescenza di singole molecole od organelli. L’analisi cellulare viene eseguita per valutare e misurare lo stato corrente delle cellule, come l’integrità cellulare, la tossicità, la vitalità e varie altre applicazioni di ricerca. Una parte integrante dell’analisi cellulare è la raccolta, analisi ed esportazione dei dati in un formato utile e significativo.
Flusso di lavoro per l’analisi cellulare
I protocolli per la coltivazione, la semina e il mantenimento di cellule variano a seconda dei diversi modelli cellulari; tuttavia, i passaggi descritti di seguito illustrano un flusso di lavoro generale per i saggi di imaging basati su cellule dalla preparazione iniziale del terreno fino all’analisi sperimentale a valle utilizzando un sistema di imaging ad alto contenuto e un software di analisi cellulare.
- Seminare le cellule nel contenitore prescelto (vetrini multipozzetto, piastre, micropiastre)
- Trattare le cellule: eseguire i trattamenti cellulari con i composti desiderati, se previsti nel flusso di lavoro del saggio
- Colorare per marcatori: se necessario, marcare le cellule con i fluorofori desiderati (coloranti fluorescenti, proteine fluorescenti, fusioni peptidiche, ecc.
- Acquisire l’immagine cellulare: collocare la piastra nel sistema di imaging cellulare e iniziare l’acquisizione delle immagini delle cellule vive
- Analizzare l’immagine cellulare: utilizzare un software di analisi per imaging cellulare per eseguire un’analisi quantitativa dell’immagine delle cellule vive
Accelerazione delle applicazioni di screening con l’imaging automatizzato e ad alto contenuto
Questo webinar tecnico sarà incentrato sulle applicazioni di screening ad alto contenuto, come quelle coinvolte nella ricerca sui virus, negli studi sulla crescita neuritica e nello sviluppo di modelli basati su organoidi. Le informazioni fornite saranno di interesse per i ricercatori che attualmente lavorano con saggi basati su cellule e utilizzano tecniche di imaging su cellule vive e per quelli che desiderano automatizzare e/o ottimizzare il loro attuale flusso di lavoro di imaging.
Tipi di metodiche di imaging cellulare
Quali che siano le vostre esigenze, da un sistema ad alto rendimento e ad alto contenuto a un sistema di facile utilizzo, le nostre soluzioni per imaging cellulare includono applicazioni di acquisizione e analisi adatte alle necessità di un laboratorio di screening o di ricerca. Qui abbiamo descritto brevemente varie metodiche utilizzate nell’imaging cellulare:
- La microscopia a contrasto di fase permette di osservare cellule intatte
- L’imaging a fluorescenza consente di osservare singole molecole od organelli
- La microscopia in campo chiaro è utile per la visualizzazione rapida di cellule intere
- La microscopia confocale è la tecnologia più adatta per ottenere immagini di alta qualità e per la ricostruzione 3D delle cellule
- L’imaging su cellule vive 4D combina la microscopia confocale con quella in time-lapse
- La microscopia automatizzata utilizza funzioni software e hardware che assicurano un’affidabile messa a fuoco in tutti i campi visivi, combinate con un sofisticato software di analisi delle immagini che permette di ottenere dati quantitativi riproducibili e soggettivi
Applicazioni e saggi basati su cellule di uso comune
Qui abbiamo riunito vari argomenti relativi ai saggi basati su cellule, dalle colture cellulari 3D alla ricerca sulle cellule staminali, nonché applicazioni per gli screening di tossicità e quelli sui cardiomiociti.