Produzione di plasmidi
Produzione affidabile di DNA plasmidico: eliminando gli insuccessi dei lotti e accelerando il progresso clinico.
Che cos’è un plasmide?
Un plasmide è una piccola molecola di DNA circolare distinta dal DNA cromosomico, che possiede la singolare capacità di replicarsi in modo indipendente. Essenziali in biologia molecolare, i plasmidi facilitano la manipolazione, lo studio e la produzione di DNA plasmidico dei geni. La clonazione molecolare, una tecnica utilizzata per produrre copie identiche di frammenti di DNA, è intrinsecamente legata alla produzione di plasmidi. I plasmidi fungono da veicolo per replicare questi frammenti di DNA nelle cellule batteriche. Introducendo un gene di interesse in un plasmide, i ricercatori possono produrre grandi quantità di quel gene per varie applicazioni, colmando le lacune nella nostra comprensione della codifica genetica.
Scoprite il legame fondamentale tra la produzione di plasmidi e lo sviluppo di farmaci. Poiché i tassi di successo dei farmaci dipendono da previsioni accurate, i plasmidi svolgono un ruolo fondamentale nel conferimento efficiente di DNA per terapie geniche e vaccini, offrendo soluzioni più sicure e ampliabili per affrontare varie malattie.
A cosa servono i plasmidi?
- Clonazione di geni: Ampiamente riconosciuti per le loro capacità di clonazione, i plasmidi consentono la duplicazione di geni specifici. L’introduzione di un gene di interesse in un plasmide ne consente la propagazione all’interno delle cellule batteriche, producendo grandi quantità del materiale genetico desiderato.
- Vettori di espressione: I plasmidi agiscono come vettori, facilitando l’espressione dei geni desiderati in una cellula ospite designata. Una volta integrato nella molecola di DNA plasmidico, il gene di interesse viene introdotto nell’ospite, stimolando l’espressione genica.
- Editing genetico: Il ricorso ai plasmidi per l’editing genico, come CRISPR-Cas9, garantisce precisione. Il plasmide trasporta i componenti necessari per la modifica genetica, alterando la struttura del DNA della cellula ospite.
- Produzione di proteine: Per la produzione di proteine su larga scala, i plasmidi contengono il gene richiesto, inducendo la cellula ospite a generare la proteina codificata.
- Scoperta farmacologica: Essenziali per la scoperta farmacologica, i plasmidi sono vettori vitali di geni terapeutici utilizzati nella terapia cellulare e genica e nei vaccini a base di mRNA. Una produzione efficiente di plasmidi è fondamentale per soddisfare la crescente domanda di trattamenti da parte del mercato.
Anatomia di una cellula batterica che mostra la sua struttura, dove risiedono e si replicano i plasmidi, piccole molecole circolari di DNA. Questo ambiente procariotico è fondamentale per la produzione di DNA plasmidico, una pietra miliare della biologia molecolare e della ricerca genetica.
Flusso di lavoro della clonazione molecolare per la produzione di DNA plasmidico
- Progettazione strategica: Nel processo di progettazione strategica per la clonazione, la fase iniziale prevede l’ottimizzazione della strategia di clonazione, compresa la selezione di enzimi di restrizione e vettori appropriati, nonché la progettazione di primer per l’amplificazione del gene, ottimizzando al contempo le condizioni di PCR.
- Preparazione del campione: Successivamente, ha luogo la preparazione del campione di DNA, che comprende attività come l’estrazione del DNA, l’amplificazione genica mediante PCR e la purificazione dei frammenti di DNA.
- Digestione enzimatica: In seguito, i frammenti di DNA vengono sottoposti a digestione mediante enzimi di restrizione, un processo che può essere automatizzato con sistemi di pipettaggio robotizzati.
- Ligazione: Questi frammenti digeriti vengono sottoposti a ligazione con un vettore compatibile mediante una reazione di ligazione automatizzata, facilitata da sistemi come il pipettaggio robotizzato o i robot preposti alla manipolazione dei liquidi.
- Trasformazione: Il DNA legato viene successivamente trasformato in cellule competenti mediante sistemi di elettroporazione automatizzati, utilizzando apparecchiature specializzate come elettroporatori o dispositivi microfluidici.
- Semina in piastre: Le cellule trasformate trovano posto su terreni selettivi attraverso un sistema di semina in piastre automatica come il Sistema di prelievo di colonie microbiche QPix® Microbial Colony Picker, promuovendo la crescita di colonie ricombinanti.
- Prelievo e screening: Queste colonie vengono poi prelevate e selezionate automaticamente dal nostro Sistema di prelievo di colonie microbiche QPix®.
- Sequenziamento – I cloni che superano la fase di screening sono soggetti a sequenziamento automatico del DNA per confermare il successo della clonazione del frammento di DNA desiderato.
- Analisi dei dati: I dati di sequenziamento vengono poi analizzati con strumenti software automatizzati, che non solo identificano ma annotano i frammenti di DNA clonati e le loro sequenze.
Scoprite il nostro pacchetto di mini-preparazioni plasmidiche automatizzate
Guardate Rebecca Kreipke, la nostra specialista di applicazioni sul campo, mentre dimostra la nostra soluzione per la preparazione dei plasmidi
Questa piattaforma completamente automatizzata è progettata per i ricercatori che desiderano ottimizzare il processo di preparazione dei plasmidi. Perfetta per ottenere una produttività medio-bassa con protocolli convalidati, la nostra configurazione di automazione di livello base ha il potenziale per espandersi. Caratteristiche:
- Sistema di prelievo di colonie microbiche QPix® XE
- Lettore per micropiastre SpectraMax® i3x
- Sistema di gestione dei liquidi
- Incubatore con agitazione
- Braccio robotizzato
- Supporto portapiastre
AAV – PLASMIDI
Approfondite l’intricato flusso di lavoro dei plasmidi AAV, una pietra miliare della bioproduzione. Il virus adeno-associato (Adeno-Associated Virus, AAV) si distingue per la sua replicazione minima e la bassa immunogenicità per l’uomo. Questo processo include tutto, dalla realizzazione del DNA del vettore AAV e l’espansione del plasmide, alla purificazione e trasduzione di cellule di mammifero. Scoprite le fasi di precisione, dall’ottimizzazione delle condizioni di coltura allo screening di cloni ad alto rendimento.
Dalla clonazione molecolare alla coltura cellulare 3D: Integrazione della produzione di plasmidi nel flusso di lavoro dello screening degli organoidi
La produzione di plasmidi in modelli cellulari 3D è essenziale per l’analisi della funzione genica. Il processo inizia con la coltivazione dei batteri e culmina con l’integrazione dei geni nelle colture 3D. Attraverso i plasmidi, i ricercatori esaminano la morfogenesi dei tessuti, la crescita degli organoidi e i potenziali target terapeutici. Questo flusso di lavoro offre profonde conoscenze sullo sviluppo dei tessuti in 3D e sulle sfumature della ricerca biomedica. Per maggiori dettagli, approfondite l’argomento.
Applicazioni e metodi per la produzione di DNA plasmidico
Risorse recenti
Flusso di lavoro automatizzato per la produzione di plasmidi
Nella produzione di DNA plasmidico, il gene target è fondamentale per l’efficienza della clonazione molecolare. Le nostre soluzioni di automazione di laboratorio migliorano il flusso di lavoro di clonazione plasmidica, dall’isolamento del DNA al prelievo delle colonie. Personalizziamo i sistemi di produzione di plasmidi per le esigenze biotecnologiche attuali e future. Grazie alla nostra esperienza nelle tecniche di clonazione molecolare, integriamo le migliori tecnologie nel vostro processo. Forniamo un’assistenza continua, garantendo l’allineamento con l’evoluzione delle richieste di produzione di plasmidi.