Innanzitutto, l’anticorpo di cattura viene immobilizzato sul fondo del pozzetto della micropiastra.
La maggior parte dei saggi ELISA viene eseguita in micropiastre a 96 o 384 pozzetti. Le più comuni sono quelle a 96 pozzetti, che sono talvolta chiamate piastre ELISA. Il fondo dei pozzetti della micropiastra funge da superficie solida a cui si legano gli anticorpi e altri reagenti. Generalmente le micropiastre sono incluse in un kit ELISA.
I kit ELISA CatchPoint SimpleStep permettono di ottenere i risultati in soli 90 minuti!
Aggiunta del campione nel pozzetto: l’antigene presente nel campione si lega all’anticorpo di cattura.
Il materiale non legato viene lavato via, lasciando soltanto l’antigene di interesse e riducendo al minimo la possibilità di un elevato segnale di fondo.
Soluzione completa per il flusso di lavoro per saggi ELISA mediante l’uso del lettore per micropiastre EMax plus con il software di acquisizione e analisi dei dati SoftMax Pro e la lavatrice per micropiastre MultiWash+.
Risparmia tempo e denaro con il lettore per micropiastre SpectraMax, il software SoftMax Pro e un pacchetto lavatrice per micropiastre AquaMax.
L’anticorpo di rilevazione coniugato a un enzima si lega a un secondo sito sull’antigene di interesse, offrendo la possibilità di rilevare l’antigene.
Gli anticorpi non legati vengono lavati via, lasciando soltanto quelli specifici per il target di interesse e riducendo al minimo la possibilità di un elevato segnale di fondo.
La lavatrice per micropiastre AquaMax: Aspirazione e dispensazione di 96 e 384 pozzetti avvengono contemporaneamente in tutti i pozzetti, con conseguente elevata precisione dei saggi e processamento più rapido delle micropiastre senza indicizzazione meccanica delle piastre o processamento dei quadranti.
Il substrato viene convertito dall’enzima coniugato all’anticorpo di rilevazione, provocando una variazione di colore di intensità proporzionale alla quantità di antigene presente.
A seconda dell’enzima e del substrato utilizzati, il segnale letto può anche essere fluorescente o luminescente.
Il lettore per micropiastre rileva il prodotto di reazione colorato e fornisce valori di densità ottica (Optical Density, OD) che indicano la quantità di luce assorbita dal contenuto di ciascuno pozzetto.
Un lettore per piastre ELISA, come il lettore di assorbanza per micropiastre ELISA SpectraMax ABS Plus, rileva la variazione di colore che si produce in presenza dell’antigene bersaglio. In particolare, il sistema determina in che misura la luce che passa attraverso i pozzetti della micropiastra viene assorbita dal materiale presente nei pozzetti stessi. Quanto maggiore è la quantità di antigene presente, tanto più elevato sarà il valore di assorbanza.
Viene utilizzato un software per lettori per piastre ELISA, come il nostro software di analisi dei dati SoftMax Pro, per tracciare le curve standard e calcolare i risultati a partire dai valori di assorbanza forniti dal lettore per micropiastre.
Viene generata una curva standard in modo che sia possibile calcolare accuratamente la quantità di antigene presente in ciascun campione. Un protocollo preconfigurato aiuta a risparmiare tempo calcolando automaticamente i risultati.
Viene calcolata la quantità di antigene presente in ciascun campione ed è possibile confrontare campioni diversi, ad esempio cellule sottoposte a condizioni di trattamento differenti.
Offriamo celle di lavoro scalabili e pronte per l’automazione, dal livello base a quello avanzato, personalizzabili per soddisfare le specifiche esigenze di ricerca.
L’automazione di un flusso di lavoro ELISA può eseguire i noiosi passaggi della preparazione del campione, del pipettaggio dei reagenti e del lavaggio delle micropiastre e può migliorare la riproducibilità dei risultati. Un flusso di lavoro ELISA automatizzato può essere abbinato al software e ai componenti di controllo, creando celle di lavoro scalabili e ad alta produttività.