SEMINA DELLE CELLULE
Seminare le cellule aderenti o in sospensione nel contenitore prescelto, ad esempio piastre di coltura, vetrini multipozzetto e micropiastre. Incubare le cellule nelle condizioni di coltura normali (ossia 37 °C, 5% di CO2). Per le cellule aderenti, l’incubazione notturna delle cellule seminate fornirà loro il tempo necessario per attaccarsi e crescere.
Piastre a 96 o 384 pozzetti
Per la maggior parte delle colture cellulari per screening ad alto contenuto e ad alto rendimento vengono utilizzate micropiastre a 96 o 384 pozzetti.
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TRATTAMENTO CON COMPOSTI
Se necessario per il protocollo, trattare le cellule con i composti di interesse.
I composti possono essere aggiunti alle cellule per un periodo compreso tra pochi minuti e vari giorni a seconda del meccanismo d’azione dei composti e della risposta biologica in studio. Ad esempio, i saggi di apoptosi e di internalizzazione dei recettori richiedono generalmente tempi di incubazione più brevi, mentre per i saggi di citotossicità multiparametrici occorrono periodi più lunghi. Nel caso di trattamenti prolungati, può essere necessario sostituire i composti durante l’incubazione.
COLORAZIONE PER MARCATORI
Le cellule vive possono essere colorate con una varietà di fluorofori o essere trasfettate/trasdotte con costrutti contenenti proteine di fusione con peptidi fluorescenti. Per la colorazione occorre seguire le istruzioni del produttore. La colorazione non è necessaria per tutte le applicazioni su cellule vive; esistono tecniche di imaging e analisi senza marcatura che permettono di seguire e monitorare le cellule utilizzando la sola microscopia in campo chiaro.
Kit del saggio
Kit del saggio affidabili e facili da utilizzare per la ricerca nel campo delle scienze naturali, la scoperta e lo sviluppo di farmaci e i saggi biologici. I nostri kit del saggio sono ottimizzati per l’uso sui nostri strumenti. Approfittate della possibilità di sottoporre a screening un maggior numero di composti in una fase più precoce del processo di scoperta farmacologica e di caratterizzare un profilo concentrazione-risposta completo dei composti in esame.
Gamma di soluzioni di imaging ad alto contenuto ImageXpress
I nostri sistemi per imaging e analisi ad alto contenuto offrono soluzioni scalabili flessibili, facilitando l’evoluzione del vostro sistema di pari passo con le vostre attività di ricerca. Sono provvisti di opzioni e moduli per soddisfare le vostre specifiche esigenze di ricerca, compresi obiettivi, filtri, modalità di imaging e condizioni ambientali.
CONFIGURAZIONE DELLE IMPOSTAZIONI DI CONTROLLO AMBIENTALE
Dopo l’aggiunta di coloranti e composti, collocare la piastra nello strumento di imaging appropriato integrato con funzionalità di controllo ambientale quali gas (CO2, O2), temperatura e umidità.
Per i saggi in time-lapse a lungo termine, è essenziale mantenere un ambiente fisiologico naturale per preservare la salute delle cellule vive ed evitare problemi di deriva del fuoco durante l’acquisizione in time-lapse.
ACQUISIZIONE DI IMMAGINI DELLE CELLULE VIVE
Per le acquisizioni in time-lapse continuo, configurare la durata totale della serie temporale e gli intervalli di imaging, ad es. acquisizione di immagini ogni ora per 24 ore.
È possibile eseguire acquisizioni in time-lapse discontinuo, che prevedono che la piastra venga prelevata e rimessa nell’incubatore e sottoposta a imaging in vari momenti diversi.
Sistema di imaging cellulare automatizzato
Il sistema di imaging cellulare automatizzato ImageXpress® Pico è più di un microscopio digitale e combina funzionalità di imaging ad alta risoluzione con un’analisi potente. Che sia per applicazioni di imaging a fluorescenza o per saggi in campo chiaro, questo imager automatizzato offre protocolli preconfigurati completi per i saggi basati su cellule per ridurre la curva di apprendimento, permettendo di iniziare a eseguire rapidamente gli esperimenti.
Software di acquisizione e analisi per imaging cellulare
Il software di acquisizione e analisi automatizzata delle immagini CellReporterXpress funziona con i sistemi ImageXpress® Pico. Presenta un’interfaccia pulita e facile da imparare per l’esecuzione di analisi quantitative sulle immagini acquisite mediante microscopia automatizzata. Il software permette l’analisi distribuita delle immagini per aumentare il rendimento ed è la soluzione ideale per la scalabilità delle applicazioni di imaging per microscopia con vetrini o micropiastre.
ANALISI DELLE IMMAGINI DELLE CELLULE VIVE
Analizzare le immagini con il software di analisi per imaging cellulare per generare letture multiparametriche per le risposte biologiche in studio. È possibile generare ed esaminare dati cinetici per le acquisizioni in time-lapse.