Imaging su cellule vive

Cos’è l’imaging su cellule vive?

Benefici della ricerca su cellule vive

L’imaging su cellule vive è uno strumento di ricerca fondamentale nei laboratori di biologia cellulare e in un’ampia varietà di settori e ha portato alla scoperta di target farmacologici e farmaci candidati nonché di meccanismi molecolari coinvolti nelle malattie. Per questi ricercatori è cruciale la possibilità di sviluppare saggi in grado di riprodurre al meglio le caratteristiche delle cellule in vivo. Di seguito sono riportati alcuni vantaggi associati all’imaging su cellule vive:

• Il monitoraggio di cellule vive nel tempo fornisce più di una semplice istantanea di cosa sta succedendo nelle cellule e allo stesso tempo offre la possibilità di visualizzare eventi transitori che potrebbero sfuggire nei saggi al punto finale, permettendo di identificare i punti temporali ottimali da prendere in esame in questo tipo di saggi.
• La rigorosa regolazione delle condizioni ambientali assicura che i processi e le strutture cellulari in studio si trovino nel loro stato fisiologico nativo.
• L’imaging su cellule vive nel loro stato naturale riduce al minimo gli artefatti che possono derivare da altre tecniche di imaging, come la fissazione delle cellule e l’immunocolorazione.
• È possibile studiare simultaneamente in tempo reale la localizzazione e il trasporto delle biomolecole cellulari insieme alla progressione di vari pathway di trasduzione del segnale.
• L’acquisizione di immagini sul piano laterale e assiale nel corso del tempo permette di generare immagini e dati 4D.
• L’imaging delle dinamiche molecolari nelle cellule vive genera dati qualitativi e quantitativi che non possono essere ottenuti mediante altre metodiche biochimiche.

Flusso di lavoro per l’imaging e l’analisi cellulare

I protocolli utilizzati per la coltura, la semina e il mantenimento delle cellule vive variano in base ai diversi modelli cellulari; tuttavia, i passaggi riportati di seguito descrivono un flusso di lavoro generale per i saggi su cellule vive.

https://main--moleculardevices--hlxsites.hlx.page/applications/cell-imaging

Visualizza il flusso di lavoro dettagliato

1. Seminare le cellule nel contenitore prescelto (vetrini multipozzetto, piastre, micropiastre)
2. Trattare le cellule: eseguire i trattamenti cellulari con i composti desiderati, RNAi, ecc., se previsti nel flusso di lavoro del saggio.
3. Colorare per marcatori: se necessario, marcare le cellule con i fluorofori desiderati (coloranti fluorescenti, proteine fluorescenti, fusioni peptidiche, ecc.
4. Controlli ambientali: se il tempo di acquisizione è prolungato o il saggio è un esperimento su cellule vive in time-lapse (continuo o discontinuo), assicurarsi che esista un controllo completo delle condizioni ambientali, compresi i gas presenti, la temperatura e l’umidità.
5. Acquisire l’immagine cellulare: collocare la piastra nel sistema di imaging automatizzato e iniziare l’acquisizione delle immagini delle cellule vive.
6. Analizzare l’immagine cellulare: utilizzare un software di analisi per imaging cellulare per eseguire un’analisi quantitativa delle immagini delle cellule vive

Sistema di imaging su cellule vive

I sofisticati sistemi di imaging su cellule vive offrono la possibilità di regolare le condizioni ambientali per preservare la salute e la vitalità delle cellule monitorando allo stesso tempo le dinamiche molecolari e cellulari dal livello di singola cellula al livello di organismo. Dallo studio di eventi a cinetica rapida all’esecuzione di saggi in time-lapse a lungo termine, l’imaging automatizzato su cellule vive permette di osservare direttamente processi biologici dinamici e di ottenere una grande quantità di informazioni sulle cellule.

• Le diverse funzionalità, dall’imaging in campo chiaro senza marcatura all’imaging in fluorescenza multicolore, offrono la flessibilità necessaria per una varietà di applicazioni di imaging su cellule vive.
• Le elevate velocità di acquisizione permettono di esaminare eventi a cinetica rapida, come le oscillazioni del calcio nei cardiomiociti.
• Le solide funzionalità di messa a fuoco degli strumenti automatizzati di imaging su cellule vive garantiscono il mantenimento di un fuoco ottimale durante l’intero processo di acquisizione, una caratteristica fondamentale per ottenere dati di imaging su cellule vive accurati.

Applicazioni e saggi

I progressi compiuti nel campo dei microscopi automatizzati con camere di controllo ambientale integrate, nonché nella tecnologia delle proteine fluorescenti e dei fluorofori sintetici, hanno ampliato le possibilità dei ricercatori che studiano i processi biologici nelle cellule vive.

I nostri sistemi per imaging e analisi ad alto contenuto offrono soluzioni scalabili flessibili, facilitando l’evoluzione del vostro sistema di pari passo con le vostre attività di ricerca. Sono provvisti di opzioni e moduli per soddisfare le vostre specifiche esigenze di ricerca, compresi obiettivi, filtri, modalità di imaging e controllo ambientale. Di seguito potete trovare una raccolta di applicazioni e saggi che utilizzano queste funzionalità chiave per le vostre attività di ricerca basate sull’imaging su cellule vive:

Risorse recenti

Flusso di lavoro per l’imaging e l’analisi di cellule vive

Il flusso di lavoro descritto per l’imaging su cellule vive è un esempio generale di un saggio in time-lapse continuo a lungo termine su cellule vive. Questo flusso di lavoro illustra i vari passaggi dalla semina delle cellule all’analisi delle immagini e indica i materiali e la strumentazione necessari per eseguire un saggio su cellule vive, compresi un sistema automatizzato di imaging ad alto contenuto e un software di imaging e analisi cellulare.

Risorse per l’imaging su cellule vive

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