Anticorpi monoclonali (mAb)

Sviluppo di linee cellulari

Lo sviluppo di linee cellulari è una fase cruciale nel processo di generazione di molecole biofarmaceutiche, come gli anticorpi monoclonali. Il processo spesso ha inizio con la trasfezione del tipo della cellula ospite con il DNA che codifica per la proteina terapeutica di interesse in modo da ottenere l’integrazione casuale o diretta del DNA target nel genoma della cellula ospite. Viene eseguito lo screening di migliaia di cloni per isolare le rare cellule altamente produttive, un processo manuale che richiede molto tempo.

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Confronto tra i metodi di clonaggio tradizionali e il sistema f.sight

In questo studio, abbiamo condotto sei set di esperimenti, eseguendo il clonaggio di due linee cellulari CHO con terreno di coltura cellulare privo di componenti animali (Animal-Component-Free, ACF) e con supplementi e abbiamo confrontato le prestazioni del CloneSelect™ f.sight Single-Cell Printer con quelle di altre due metodiche di clonaggio accettate (citometria a flusso e diluizione limite).

Guardate il nostro video introduttivo e scaricate la nota applicativa.

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Identificazione affidabile di cellule CHO-S monoclonali

La crescita delle cellule CHO in terreno CloneMedia CHO Growth A è un metodo di clonaggio di tali cellule più efficiente rispetto alla diluizione limite in terreno liquido. Il terreno semisolido immobilizza le cellule, evitando che esse si muovano durante il trattamento di routine. Ciò consente ai ricercatori di monitorare in maniera affidabile la crescita di una singola cellula fino alla formazione di una colonia.

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eBook: Ottimizzazione delle linee cellulari di valore elevato

In questo eBook, presentiamo una panoramica del flusso di lavoro per lo sviluppo di linee cellulari nonché soluzioni ad alto rendimento per accelerare il processo e per facilitare e velocizzare la selezione di linee di cellule di mammifero altamente produttive.

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Miglioramento dello sviluppo di ibridomi virus-specifici

I virus a DNA a doppio filamento (Double-Stranded DNA, ds-DNA) causano una varietà di malattie nell’uomo. Le specie dell’ordine degli Herpesvirus e delle famiglie Adenovirus e Papillomavirus possono causare sintomi nell’uomo, con manifestazioni simili. Inoltre, la conferma della diagnosi sierologica o basata su proteine per un determinato virus può essere complicata a causa della conservazione degli antigeni nei genomi virali. Un elevato grado di omologia proteomica e di reattività crociata del siero determinano una scarsa capacità di distinguere le singole specie di virus a ds-DNA. Lo scopo della ricerca era identificare la linea cellulare produttiva ottimale in grado di secernere un anticorpo monoclonale non cross-reattivo altamente specifico da utilizzare nello sviluppo di composti bioterapeutici.

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Selezione di ibridomi utilizzando il terreno HAT

La selezione degli ibridomi dopo la fusione di mielomi e cellule della milza è una fase cruciale nella produzione di anticorpi monoclonali. Per questa operazione, gli scienziati spesso utilizzano il metodo HAT (ipoxantina-aminopterina-timidina).

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Tecnologia degli ibridomi

La tecnologia degli ibridomi è una metodica per la produzione di massa di anticorpi in una linea cellulare ibrida generata dalla fusione di linfociti B produttori di anticorpi con una linea cellulare di mieloma immortalizzata a formare le cosiddette cellule di ibridoma. Poiché ogni linfocita B produce un determinato anticorpo, è possibile utilizzare il clonaggio di singole cellule di ibridoma per generare una libreria diversificata di anticorpi monoclonali specifici su vasta scala; tali anticorpi vengono spesso impiegati nella prevenzione, nella diagnosi e nel trattamento delle malattie.

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Monoclonalità

Lo sviluppo di linee cellulari e la verifica della monoclonalità sono fasi cruciali nel processo di generazione di molecole biofarmaceutiche, come gli anticorpi monoclonali. In seguito all’isolamento di una singola cellula vitale che esprime in maniera robusta la proteina di interesse, può essere sviluppata una linea cellulare. Un requisito fondamentale in questo processo è la documentazione delle evidenze di clonalità. Generalmente, la documentazione della clonalità è basata su immagini e prevede l’acquisizione di un’immagine di una singola cellula da includere nella presentazione di richieste alle autorità regolatorie.

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Phage display

Il phage display (o esposizione fagica) è una tecnica utilizzata per studiare l’interazione di proteine esposte sulla superficie di un batteriofago con altre molecole, come peptidi, DNA e altre proteine. La tecnica del phage display è comunemente utilizzata per scoprire le interazioni ad alta affinità tra anticorpi e antigeni, che svolgono un ruolo cruciale nella patogenesi virale, nei vaccini e in altri trattamenti.

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Preparazione e semina di cellule in terreno semisolido

La semina di cellule in terreno viscoso semisolido può essere problematica quando effettuata per la prima volta. Guardate il nostro tutorial di 4 minuti per alcuni suggerimenti e trucchi per seminare le cellule in questo terreno con maggiore efficienza.

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