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Conta cellulare

Scoprite come contare le cellule utilizzando una varietà di metodi, tecniche e tecnologie

Metodi e tecniche per le conte cellulari

La capacità di quantificare in modo accurato il numero di cellule nelle micropiastre multipozzetto permette di eseguire una molteplicità di applicazioni biologiche per studiare la salute o la proliferazione cellulare. Queste applicazioni possono prevedere l’uso di saggi endpoint per l’imaging di nuclei colorati in fluorescenza o richiedere un solido sistema a luce trasmessa per l’imaging di cellule vive o fissate non colorate. In entrambi i casi, il conteggio delle cellule attraverso una procedura di segmentazione tramite software deve essere rapido e affidabile.

Qui vengono illustrati i vari metodi e le varie tecniche utilizzati per valutare la proliferazione, la citotossicità e la confluenza attraverso la conta cellulare, che può essere eseguita rapidamente mediante imaging in campo chiaro o a fluorescenza utilizzando un sistema di imaging automatizzato e un software di analisi.



Conta cellulare mediante imaging cellulare automatizzato

La conta cellulare è una procedura fondamentale e critica per numerosi esperimenti biologici. I saggi per la determinazione della tossicità di composti farmacologici, della proliferazione cellulare e dell’inibizione della divisione cellulare richiedono la valutazione del numero o della densità delle cellule in un pozzetto. L’imaging automatizzato può velocizzare notevolmente il processo di conta cellulare, permettendo allo stesso tempo di ridurre il lavoro manuale e gli errori umani.

Il flusso di lavoro esemplificativo descritto qui di seguito mostra che è possibile collocare semplicemente il campione nel sistema di imaging cellulare automatizzato ImageXpress® Pico e, dopo una semplice configurazione nel software, il sistema è in grado di contare automaticamente le cellule, permettendo agli utenti di dedicarsi ad altro. Le cellule possono essere contate con una varietà di metodi, come la conta cellulare senza marcatura in luce trasmessa o la rilevazione di coloranti nucleari con imaging a fluorescenza.

Imaging cellulare automatizzato

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Tecnologia di rilevazione cellulare StainFree: un metodo senza marcatura per l’analisi delle conte cellulari e della confluenza cellulare

Solitamente, i saggi di imaging basati su cellule richiedono l’uso di sonde fluorescenti che possono essere tossiche per le cellule vive o funzionare soltanto in cellule fissate. Un metodo senza marcatura per l’analisi delle conte cellulari e della confluenza cellulare vi permette di monitorare in maniera quantitativa la proliferazione e la salute delle cellule senza dover ricorrere a flussi di lavoro laboriosi che potrebbero compromettere la vitalità cellulare.

Il lettore per micropiastre multimodale SpectraMax® i3 con citometro per imaging SpectraMax® MiniMax™ 300 utilizza l’esclusiva tecnologia di rilevazione cellulare StainFree™ con brevetto depositato per permettervi di eseguire saggi di proliferazione cellulare, di citotossicità e di altro tipo senza coloranti nucleari come il DAPI, che si intercala nel DNA, o coloranti per cellule vive, che a lungo termine sono in realtà tossici per le cellule.

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Tecnologia di rilevazione cellulare Stainfree

Confronto tra i flussi di lavoro per l’analisi delle cellule con la tecnologia StainFree e con i coloranti Live Red Dye e DAPI. Il flusso di lavoro della tecnologia StainFree permette di risparmiare circa 70 minuti rispetto al metodo di fissazione e colorazione con DAPI. Inoltre, le cellule analizzate con la tecnologia StainFree continuano a essere pienamente vitali e possono essere utilizzate in ulteriori saggi.

 

 

Conte cellulari con la tecnologia StainFree

L’algoritmo di rilevazione cellulare StainFree consente di evitare la colorazione delle cellule per le conte cellulari e le misurazioni di confluenza mediante una tecnologia analitica proprietaria in luce trasmessa (Transmitted Light, TL). Qui descriviamo l’analisi di una varietà di tipi cellulari di uso comune mediante il nostro metodo senza marcatura.

Ultime risorse

Risorse per la conta cellulare

Video e webinar

Classificazione delle cellule a luce trasmessa

Classificazione delle cellule a luce trasmessa sul sistema ImageXpress Pico

Prodotti e servizi correlati della conta cellulare

I contatori di cellule automatizzati, come il lettore per micropiastre multimodale SpectraMax® i3x con citometro SpectraMax MiniMax o il sistema di imaging cellulare automatizzato ImageXpress® Pico, permettono di valutare la proliferazione, la citotossicità o la confluenza mediante imaging in campo chiaro o a fluorescenza.


Il lettore per micropiastre multimodale SpectraMax i3x con citometro SpectraMax MiniMax consente di eseguire rapidamente applicazioni di imaging e analisi cellulare e fornisce una visione dettagliata delle alterazioni fenotipiche che accompagnano la citotossicità, la proliferazione cellulare e l’espressione di proteine. La nostra tecnologia per conta cellulare StainFree include adesso canali di rilevazione della fluorescenza rossa e verde e ulteriori funzioni di analisi in campo chiaro.


Il sistema di imaging cellulare automatizzato ImageXpress Pico è un contatore di cellule automatizzato che usa l’imaging in luce trasmessa o a fluorescenza per fornire risultati ricchi di dati, come le dimensioni nucleari, l’area cellulare totale e media e l’intensità. Oltre ai metodi standard di conta cellulare basati sulla rilevazione dei corpi cellulari o dei nuclei fluorescenti, il software include tre protocolli aggiuntivi per contare le cellule in luce trasmessa in base alle loro dimensioni e alla loro forma.